DNA免疫激活序列特异性结合蛋白的研究

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DNA免疫激活序列(immunostimulatorysequence,ISS)是发现于细菌DNA中的一些以未甲基化的CpG二核苷酸对为核心的具有免疫激活功能的核苷酸序列.该项研究试图通过筛选免疫细胞内的ISS特异性的DNA结合蛋白来鉴定ISS的特异性受体,以为进一步探讨ISS的分子作用机制奠定实验基础.为此,我们采用酵母单杂交系统筛选了人骨髓cDNA文库,从中获得了4个阳性克隆,序列分析表明其中两个编码抗体的轻链,分别与抗DNA抗体和抗乙肝表面抗原抗体(HBsAb)同源,提示包括HBsAb在内的某些抗体可选择性地与ISS结合.为提供进一步的实验依据,我们进而以ELISA方法分析了多种抗体与质粒DNA之间的相互作用.由于已证明DNA激活免疫细胞时必须首先被吞入内体(Endosome)中,而且内体的酸化为其免疫激活作用所必需,所以我们在ELISA实验中比较了在不同pH条件下抗体与DNA的相互作用.
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