拟南芥AT-hook基因TEK调控阿拉伯半乳糖蛋白AGPs控制花粉外壁内层发育

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外壁内层是花粉壁的保守结构。之前的研究表明,拟南芥AT-hook/PPCdomain家族蛋白TEK是控制花粉外壁内层发育的关键基因。在其T-DNA插入突变体中,花粉外壁内层缺失。在本文中,我们发现TEK特异调控阿拉伯半乳糖蛋白AGP的表达,从而影响花粉外壁内层的发育。TEK-SRDX转基因植株与tek突变体植株表型一致,表明TEK是调控外壁内层发育的转录激活因子。凝胶电泳迁移率实验表明TEK能够直接结合核基质附着区。基因芯片筛选到661个TEK下游基因,其中包括四个AGP家族基因,AGP6, AGP11, AGP23and AGP40。定量RT-PCR实验验证了这四个基因在tek突变体中下调。TEK-Flag互补材料用来进行染色质免疫共沉淀实验。结果表明,TEK蛋白在这四个基因的启动子上有富集。AGP6是TEK的靶位点之一。凝胶电泳迁移率实验证明TEK可以直接结合在AGP6的启动子上。AGP6的点突变体变现为育性降低的表型,并且花粉外壁内层的发育有缺陷。在tek突变体背景下,用TEK启动子驱动AGP6基因可以部分恢复花粉外壁内层发育和植株的育性。这些结果表明,TEK直接调控AGPs的表达影响花粉外壁内层的发育。花粉外壁内层可能是由AGP和其他糖蛋白组成。
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