蛋白质的定量测定是生物化学和其它生物学科中经常涉及的分析任务，是临床检验中诊断疾病及检查治疗效果的重要指标，也是许多生化药物分离提纯中质量检验及食品检验中常见的分析项目。蛋白质和核酸是生命现象的物质基础。蛋白质担负着各种生理功能，从整体上维持生物体新陈代谢活动的进行，是生物性状的直接表达者。它是人体内的营养物质，参与体内细胞的结构作用，绝大多数的酶属于蛋白质，大部分的激素也是由蛋白质构成，蛋白质是人体的免疫物质，也是细胞自我复制过程中不可替代的物质，它与病毒、物质的逆转、遗传、生命的起源和生物进化有密切的联系。定量分析蛋白质也是许多生化药物的分离提纯和质量检验中最常用的手段，如酶、多肽、激素、蛋白质的分离、纯化等。对于蛋白质的测定，目前研究最多、应用最广、操作较为简便的分子光谱分析法主要有吸光光度法、荧光分析法和共振瑞利散射法，共振瑞利散射法是近几年才发展起来的新技术，突出特点是灵敏度高、简便实用，在蛋白质及核酸等生物大分子的分析测定中优势明显，前景广阔。 本论文从探索蛋白质新共振瑞利探针、研究其相互作用机理出发，以共振瑞利散射法为主要研究手段进行了各种蛋白质的研究。 论文的第一章综述了共振瑞利散射技术的原理和分析应用，以及在蛋白质测定方面的研究进展。 论文的第二章至第五章采用共振瑞利散射法，建立了测定蛋白质的新体系，并对实际样品中的总蛋白质含量进行了测定，主要内容如下： 1.茜素绿—蛋白质体系的共振瑞利散射光谱及其分析应用 基于蛋白质对茜素绿共振瑞利散射的增强作用，建立了一种测定水溶性蛋白质的新方法。在酸性BR缓冲溶液中，茜素绿在365nm处的共振瑞利散射增强与蛋白质浓度呈线性关系。对人血清白蛋白、牛血清白蛋白、γ-人球蛋白、卵白蛋白测定的检出限均低于14ょg/L。该方法快速、简便、灵敏、稳定、选择性好，用于人血清、尿液中总蛋白质含量的测定，结果满意。 2.溴百里酚蓝—蛋白质体系的共振瑞利散射光谱及蛋白质的测定 基于蛋白质对溴百里酚蓝共振瑞利散射的增强作用，建立了一种测定蛋白质的新方法。在酸性BR缓冲溶液中，溴百里酚蓝在365nm处的共振瑞利散射增强与蛋白质浓度呈线性关系。对人血清白蛋白、牛血清白蛋白、γ-人球蛋白、卵白蛋白测定的线性范围分别为0.04～2.4、0.04～2.4、0.04～1.6、0.04～1.8mg/L；相应的检出限分别为23.9、23.0、25.0、30.4よg/L。该方法快速、简便、灵敏、稳定，用于人血清、尿液中总蛋白质含量的测定，结果满意。 3.靛蓝胭脂红共振瑞利散射法测定蛋白质 在pH2.34的BR缓冲溶液中，靛蓝胭脂红及蛋白质的共振瑞利散射(RRS)均十分微弱。两者结合形成复合物能使RRS信号急剧增强，最大散射波长为393nm。人血清白蛋白、牛血清白蛋白、γ-人球蛋白、卵白蛋白的线性范围分别为0.1～3.7、0.08～3.0、0.05～2.0、0.1～2.4mg/L；相应的检出限分别为24.6、20.7、20.4、25.7よg/L。用于人血清、牛奶、豆浆、尿液中总蛋白质的测定，结果与经典的考马斯亮蓝G-250法一致。 4.甲基蓝体系共振瑞利散射法测定蛋白质 在pH2.36的BR缓冲溶液中，甲基蓝与蛋白质相互作用生成复合物，使最大波长350nm的共振瑞利散射光谱得到增强，增强程度与蛋白质浓度成正比。据此建立了测定蛋白质的新方法。人血清白蛋白、牛血清白蛋白的线性范围分别为0～2.4mg/L、0～2.8mg/L，相应检出限分别为39.3、43.4よg/L。方法的稳定性好，灵敏度高，用于人血清、尿液中总蛋白质的测定，结果与考马斯亮蓝法一致。 5.依文思蓝—蛋白质体系的共振瑞利散射光谱及其分析应用 基于蛋白质对依文思蓝共振瑞利散射的增强作用，建立了一种测定水溶性蛋白质的新方法。在酸性BR缓冲溶液中，依文思蓝在365nm处的共振瑞利散射增强与蛋白质浓度呈线性关系。对人血清白蛋白、牛血清白蛋白、γ-人球蛋白、卵白蛋白测定的检出限均低于15よg/L。该方法快速、简便、灵敏、稳定、选择性好，用于人血清中总蛋白质含量的测定，结果满意。