转MYB家族基因水稻卷叶株系的筛选与鉴定

来源 :河北科技大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wjief
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叶片是水稻进行光合作用的主要场所,水稻卷叶可以使叶片更直立从而增加群体透光率。卷叶被认为是水稻理想株型育种中重要的一环,挖掘卷叶基因并将卷叶性状引进到优良的水稻品种中可以进一步提高水稻的产量。本研究的主要内容是通过农杆菌转化法将玉米MYB家族基因导入水稻品种日本晴中,筛选稳定遗传卷叶性状的转基因水稻。通过细胞学和分子生物学技术进行鉴定并对T1代水稻的农艺性状进行调查,最后利用定量PCR技术对卷叶相关基因进行表达量分析。具体研究结果如下:1.利用GATEWAY克隆技术构建了41个玉米MYB家族转录因子基因的过表达载体,经PCR检测和测序验证表明载体构建成功。2.利用农杆菌转化法将41个MYB家族基因转入水稻愈伤组织,通过植物组织培养技术共获得水稻652株,平均每个基因16株。3.将转基因水稻移栽至大田,经过两代筛选我们发现编号为AC270的转基因植株表现为稳定且显性遗传卷叶性状,经过序列鉴定确定其为基因MYBR96的过表达植株。4.通过石蜡切片细胞学检测发现AC270卷叶植株泡状细胞数量较野生型植株有所减少。5.对AC270卷叶植株农艺性状进行调查,结果显示:卷叶植株蒸腾速率、气孔导度和胞间CO2浓度显著高于野生型植株;光合速率、千粒重、有效分蘖数、株高、结实率与野生型无显著差异。6.对影响泡状细胞发育的4个卷叶相关基因在AC270卷叶植株内的表达进行定量分析,发现卷叶植株ROC5基因表达量升高了,ACL1基因表达量降低了,SRL1和NRL1基因表达量与野生型无显著差异。以上获得的转MYBR96株系为水稻的遗传改良提供了材料和技术支撑。
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