丹参酮IIA对大鼠脊髓损伤后神经保护作用的实验研究

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背景:脊髓损伤导致了一系列严重的并发症,包括瘫痪、疼痛以及进行性的神经功能障碍等。这不仅对患者本人的身心是一个巨大的打击,也为社会增加了沉重的经济负担。基础研究、病例报道和临床试验都表明早期治疗可以改善神经功能的恢复。但迄今为止,还没有成熟的治疗方法能够对神经学的结果产生直接的治疗作用,因此需要我们不断的探索新的治疗手段。近年来很多基础科学、实验研究和临床研究都致力于防止继发性损伤,促进再生。这些研究为我们更好的理解脊髓损伤后复杂病理事件之间的相互联系提供了很好的帮助,也为我们未来的研究指明了方向。目的:探索丹参酮ⅡA对脊髓损伤大鼠后肢神经功能障碍和膀胱功能障碍的影响,并初步探讨可能的作用机制。方法:将64只大鼠随机分为四组:对照组(仅切除椎板,尾静脉注射生理盐水1ml/d,连续7天),模型组(使用NYU Impactor脊髓打击器选择25mm高度造成T9脊髓节段不完全损伤动物模型,术后予尾静脉注射生理盐水1ml/d,连续7天),丹参酮ⅡA组(造模成功后即刻予尾静脉注射丹参酮ⅡA磺酸钠注射液2Omg/Kg/d,连续给药7天),甲强龙组(造模成功后即刻予尾静脉注射甲基强的松龙30mg/Kg)。(1)采用BBB评分法评价各组大鼠后肢运动功能的恢复;(2)通过热板实验评价各组大鼠后肢感觉功能的恢复;(3)在术后7天、4周、8周时进行心脏灌注固定,取材T9脊髓和L6-S1背根神经节;通过HE染色、尼氏染色观察脊髓、L6-S1背根神经节局部组织结构的变化,并使用Ⅰ:mage-Pro Plus 6.0病理分析软件测量背根神经节细胞横截面的面积;(4)术后4周取材膀胱组织,通过Masson染色膀胱壁后观察组织结构的病理变化;(5)术后7天、术后8周通过免疫组化法标记各组脊髓中的巨噬/小胶质细胞;(6)术后4周通过尿动力学评价各组大鼠的膀胱功能。结果:(1)丹参酮ⅡA组和甲强龙组大鼠后肢运动功能都有显著改善,但甲强龙组改善更明显(P<0.05);(2)术后3天,甲强龙组感觉功能恢复较丹参酮ⅡA组快,差异有统计学意义(P<0.05);术后7天,丹参酮ⅡA组和甲强龙组感觉功能恢复程度接近;自术后2周开始,丹参酮ⅡA组表现出了比甲强龙组更明显的改善趋势,但并未达到统计学差异(P>0.05)。(3)术后3天,除对照组,余各组部分巨噬/小胶质细胞形态由分支状变为杆状或圆状,其中丹参酮ⅡA组和甲强龙组形态改变的细胞较少,数量较模型组明显减少;(4)术后4周,除对照组,余各组巨噬/小胶质细胞形态大部分转变为分枝状,其中模型组大鼠细胞数量较对照组明显减少,丹参酮ⅡA组细胞数量较模型组显著增加,而甲强龙组细胞数量较模型组增加更为明显。结论:(1)丹参酮IIA能够促进脊髓损伤大鼠后肢运动、感觉功能恢复;(2)丹参酮IIA能够改善脊髓损伤后脊髓、膀胱、神经节的病理进展,促进巨噬/小胶质细胞对神经恢复的有利影响;(3)丹参酮IIA能够提高慢性脊髓损伤大鼠排尿效率,减少无排尿性收缩,促进下尿路功能障碍的恢复;(4)尿动力学是评价大鼠下尿路功能的有效手段。
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