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盐酸米托葸醌(Mitoxantrone hydrochloride, MTO)是目前应用广泛的一种广谱抗肿瘤药,属离子型水溶性细胞毒性药物。本课题选用纳米脂质聚合物载体(Nanostructured lipid-polymer hybrid carriers,NLPCs)作为药物传递系统,考察MTO-NLPCs的制剂学特征、体内药动学和组织分布行为,研究MTO-NLPCs克服肿瘤多药耐药性的作用和细胞摄取机制。在处方前研究中,着重考察了MTO和反离子聚合物或小分子化合物之间的静电相互作用,对形成的复合物混悬液进行了粒径和室温稳定性考察,比较了不同电荷比的反离子聚合物或小分子化合物对MTO在山嵛酸甘油酯中分配系数的影响。在MTO-NLPCs口服给药研究中,采用乳化超声法,引入反离子聚合物卡拉胶与MTO产生静电相互作用,制备了MTO-NLPCs.为进一步提高口服生物利用度,制备了MTO和BCRP抑制剂CsA共同载药的多元NLPCs,即MTO-CsA-NLPCs,并对两种NLPCs的制剂学特征进行考察,发现两种纳米载体呈球形,且粒径分布比较均匀,平均粒径分别为134.3 nm和144.0 nm,Zeta电位分别为-30.8 mV和-30.9 mV。当MTO和卡拉胶的电荷比为1：1时,正负电荷完全中和,两种NLPCs的包封率最高,分别可以达到95.8%和93.3%。DSC测定结果表明MTO是以无定型的状态分散于NLPCs中。采用动态透析法考察口服NLPCs制剂的体外释放,结果表明MTO-NLPCs和MTO-CsA-NLPCs具有较好的缓释特征,48 h MTO的累积释放量分别为79.6%和85.2%,且没有突释现象。在MTO-NLPCs静脉注射给药研究中,采用乳化超声法,引入反离子聚合物葡聚糖硫酸钠(Dextran Sodium Sulfate, DS)与MTO产生静电相互作用,制备了MTO-NLPCs(iv);为提高抗肿瘤活性和克服多药耐药性,制备了MTO、BCRP抑制剂CsA和Bcl-2抑制剂GcNa共载药的多元长循环NLPCs,即PEG-MTO-CsA-GcNa-NLPCs。对两种NLPCs的制剂学特征进行考察,发现两种纳米载体呈球形,且粒径分和比较均匀,平均粒径分别为130.3 nm和125.0 nm,Zeta电位分别为-31.6 mV和-28.7mV当MTO和DS的电荷比为1：1时,正负电荷完全中和,两种NLPCs的包封率最高,分别可以达到97.4%和97.8%。DSC测定结果表明MTO是以无定型的状态分散于NLPCs中。采用动态透析法考察了静脉注射NLPCs制剂的体外释放,结果表明MTO-NLPCs(iv)和PEG-MTO-CsA-GcNa-NLPCs具有较好的缓释特征,72 h MTO的累积释放量分别为86.9%和85.7%,且没有突释现象。应用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)研究了大鼠灌胃和静脉注射给予米托葸醌溶液和NLPCs纳米制剂后的体内药动学行为,结果表明,NLPCs制剂可以显著提高血药浓度,延长药物滞留时间和消除半衰期。口服NLPCs制剂可以显著提高药物的绝对生物利用度,静脉注射NLPCs制剂药时曲线下面积显著增加,具有长循环特征。小鼠静脉注射米托葸醌纳米制剂后的组织分布行为表明,NLPCs制剂显著改变了药物的体内组织分布特点。两种NLPCs制剂在血浆、脾、脑中的浓度显著高于溶液对照组,而心、肾中的药物浓度则显著降低。应用MTT法考察了MTO的8种不同制剂对人乳腺癌敏感和耐药细胞MCF-7和MCF-7/MX的细胞毒性,通过比较各制剂的IC50值、耐药指数RI和逆转耐药因子RF,考察了MTO单独载药制剂以及MTO、BCRP抑制剂CsA、Bcl-2抑制剂GcNa的共载药制剂克服肿瘤多药耐药性的作用。结果表明,NLPCs具有部分克服多药耐药性的作用,而MTO、BCRP抑制剂CsA和Bcl-2抑制剂GcNa的共载药的NLPCs,能够产生协同的抗肿瘤活性,逆转MCF-7/MX对MTO的多药耐药性。细胞摄取实验表明NLPCs能够显著提高MTO在耐药细胞中的蓄积量,且多元共载药方案提高摄取的作用最强。低温和内吞抑制剂(叠氮钠和氯丙嗪)均显著降低NLPCs在MCF-7/MX细胞内的摄取率,而吲哚美辛未显著降低NLPCs的摄取,说明耐药细胞摄取NLPCs的过程为能量依赖性的内吞方式,且摄取过程可能存在clathrin介导的内吞途径和非caveolae介导的内吞途径。