使用蛋白酶是解决断奶仔猪日粮中大豆蛋白原料使用限量问题的一种有效手段。然而，不同来源的蛋白酶其作用效果及作用机理均可能存在差异。本论文采用体外和体内相结合的方法，评估了微生物源（枯草芽孢杆菌，Bacillus subtilis）和植物源（木瓜，Carica papaya L）蛋白酶在高大豆蛋白断奶仔猪日粮中的应用效果，并从不同的层次（动物个体水平、组织水平、分子水平）较为系统地研究了其作用机理。论文共包括八个试验。　　 试验一、蛋白酶酶学性质的研究。　　 结果表明：枯草芽孢杆菌蛋白酶的Km[酪蛋白]为2.7987mg/mL，最适pH为8.0，在pH5.0-9.0稳定性较好，最适温度为55℃，在4-85℃范围内均较稳定；木瓜蛋白酶的Km[酪蛋白]为6.6875mg/mL，最适pH为7.0，在pH5.0-9.0稳定性较好，最适温度为55℃，在65℃以下时较稳定。上述结果表明，两种蛋白酶均有在饲料工业中应用的潜力.但在未进行后处理的条件下，枯草芽孢杆菌蛋白酶可能比木瓜蛋白酶更能适应仔猪的生理内环境和饲料生产加工条件。　　 试验二、蛋白酶对饲料蛋白质体外消化率和有效营养改善值(ENIV)影响研究。　　 试验采用体外消化模拟法，以豆粕、全脂大豆和断奶仔猪全价料为消化底物，枯草芽孢杆菌蛋白酶的添加量为100mg/kg、200mg/kg、300mg/kg和400mg/kg，木瓜蛋白酶的添加量为25mg/kg、50mg/kg、75mg/kg和100mg/kg。结果表明：蛋白酶可提高大豆粕、全脂大豆和试验仔猪饲料的粗蛋白消化率和ENIV值，提高幅度与蛋白酶的添加量相关性较强；体外条件下，枯草芽孢杆菌的适宜添加量为200mg/kg，木瓜蛋白酶为75mg/kg。　　 试验三、蛋白酶对断奶仔猪生长性能的影响研究。　　 包括两个试验。枯草芽孢杆菌蛋白酶试验择300头遗传基础相同、21±1日龄、6.27±0.45kg的[（皮×杜）×（长×大）]断奶仔猪，根据体重、性别和窝别随机分为5个处理组，每个处理组6个重复，每个重复10头猪（公母各半）。5个处理组分别饲喂低大豆蛋白日粮，高大豆蛋白日粮（大豆蛋白原料用量比低大豆蛋白日粮组高35％、同时取消使用浓缩乳清蛋白和鱼粉）和在高大豆蛋白日粮基础上分别添加100，或200，或300mg/kg枯草芽孢杆菌蛋白酶。试验日粮的营养水平完全一致，试验期为14天。木瓜蛋白酶试验设计与第一次相似，不同之处为加酶日粮为在高大豆蛋白日粮基础上分别添加50，或75，或100mg/kg木瓜蛋白酶。结果表明：日粮添加蛋白酶可以改善仔猪的生长性能(P＞0.05)，提高仔猪的均匀度，显著降低仔猪腹泻率(P＜0.05）；蛋白酶的添加量与仔猪的生长性能改善程度呈较强的二次曲线关系；体内条件下，枯草芽孢杆菌蛋白酶的适宜添加量为200mg/kg，该结果与体外试验结果一致；木瓜蛋白酶的适宜添加量为100mg/kg，高于体外试验时的75mg/kg。　　 试验四、蛋白酶对断奶仔猪营养物质消化率及ENIV值的影响研究。　　 结果表明：蛋白酶可以提高日粮粗蛋白的表观消化率；蛋白酶在体外和体内条件下对日粮粗蛋白ENIV值的改善程度存在差异，体内条件下，枯草芽孢杆菌蛋白酶在添加量为200mg/kg时对日粮粗蛋白的ENIV值最大，该结果与体外试验一致；木瓜蛋白酶在添加量为100mg/kg时最大，高于体外试验时的75mg/kg；蛋白酶对日粮干物质和总能表观消化率的影响不显著(P＞0.05)。　　 试验五、蛋白酶对断奶仔猪小肠黏膜形态的影响研究。　　 于试验的第15天，从每个重复中选取1头仔猪，全麻处死后，在十二指肠、空肠及回肠中部分别截取5cm的肠段，制成石蜡切片，测量肠绒毛的高度和隐窝深度。结果表明：蛋白酶可以改善仔猪小肠粘膜的完整性，减轻大豆抗原蛋白对仔猪肠道健康的损伤；蛋白酶对小肠前段黏膜完整性的改善程度高于后段，即十二指肠的敏感性最高，空肠次之，回肠不明显。从改善效果看，枯草芽孢杆菌蛋白酶的添加量达到200mg/kg、木瓜蛋白酶的添加量达到100mg/kg，可取得较理想的效果。　　 试验六、蛋白酶对断奶仔猪消化酶活性的影响研究。　　 采样方法同试验五。结果表明：添加适宜剂量的蛋白酶可以提高仔猪胃蛋白酶、胰淀粉酶和胰蛋白酶的活性；蛋白酶对胰脂肪酶的活性均无显著影响(P＞0.05)；高剂量添加蛋白酶对仔猪消化酶活性有不利影响。　　 试验七、蛋白酶对断奶仔猪血液生化指标的影响研究。　　 结果表明：日粮添加蛋白酶可一定程度提高仔猪的血糖水平，降低血浆尿素氮和二胺氧化酶水平，提高总蛋白、白蛋白和球蛋白水平，对白蛋白和球蛋白比例影响不显著(P＞0.05)；以上结果表明，蛋白酶具有增强仔猪生理机能的作用。　　 试验八、蛋白酶对断奶仔猪小肠PepT1、b0,+AT、IGF-1和IGF-1R基因mRNA表达的影响研究。　　 采样方法同试验五。采用实时荧光定量PCR分析仔猪小肠与蛋白质消化、吸收与利用密切相关的PepT1、b0,+AT、IGF-1和IGF-1R基因的mRNA表达丰度。结果表明：蛋白酶可提高这四个基因在小肠的mRNA表达丰度，但这种影响具有肠段特异性，对PepT1 mRNA表达丰度的影响以十二指肠最显著，对b0，+AT mRNA表达丰度的影响以回肠最显著，对IGF-I和IGF-IR mRNA表达丰度的影响以空肠最显著。　　 总之，在断奶仔猪日粮中，无论是添加枯草芽孢杆菌蛋白酶还是木瓜蛋白酶，都可一定程度提高仔猪的生长性能，其机理可能包括两方面，一是改善饲料本身的消化率，二是增强仔猪对营养物质的消化、吸收和利用能力。