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1929年的一起婴儿败血症病例中首次分离出一种能产生黄色色素的致病菌,随后这种以日本微生物学家Riichi Sakazakii命名的革兰氏阴性肠杆菌——阪崎肠杆菌便进入人们的视野,引发世界性关注。目前,阪崎肠杆菌已被国际食品微生物标准委员会(International Commission for Microbiological Specifications for Foods, ICMSF)列入“对特定人群产生严重的生命危害、或产生慢性后遗症”的微生物,与肉毒梭菌(Clostridium botalinum)的A、B型毒素、单核细胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)等具有同等危害。一旦感染该菌,会对婴幼儿的健康造成严重危害,可引发坏死性小肠结肠炎、菌血症和新生儿脑膜炎等疾病,甚至可能留下严重的神经系统后遗症,死亡率高达50%。随着对婴幼儿食品安全的广泛关注和高度重视,自2010年起,重庆市婴幼儿食品安全风险监测增设了对阪崎肠杆菌的定性检测项目,以确保婴幼儿食品的安全性。本文以重庆市2012～2013年市售婴幼儿食品为监测对象,参照国标方法对婴幼儿食品中的阪崎肠杆菌进行检测。结合API20E、全自动生化分析、药敏试验(KB法)、16S rRNA PCR技术和PFGE分型技术对17株阪崎肠杆菌(包括16株婴幼儿食品分离株和1株标准菌株)进行表型和基因型特征的全面分析。主要研究结果如下：(1)2012年200份样本中共检出7株阪崎肠杆菌,检出率为3.5%；2013年300份样本中共检出9株阪崎肠杆菌,检出率为3.0%。结合2010、2011年有关数据资料,婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的检出率逐年上升,至2013年略有下降。各类型婴幼儿食品中,营养米粉中检出的阪崎肠杆菌数量最多,污染较为严重,安全状况较差,其次为营养面条,且其检出率最高。(2)17株阪崎肠杆菌经API20E生化鉴定分为4种生化谱：I型(3305373),ODC+VP+GEL+INO+; Ⅱ型(3205373), ODC-VP+GEL+INO+;Ⅲ型(3304373), ODC+VP-GEL+INCH; IV (3305173), ODC+VP+GEL+INO-.VITEK2结果显示17株阪崎肠杆菌均具有95%以上的确定性,两种生化分析的结果基本一致。(3)ES.10温度耐受性最强,最高耐受温度高达70℃；其次为ES.15,最高耐受温度为65℃。温度耐受性试验结果提示为保证婴幼儿食品中污染的阪崎肠杆菌完全灭活至少需55℃加热30min以上,或60℃5min以上,或65℃1min以上,或70℃15s以上,75℃作用基本可以保证所有阪崎肠杆菌立即灭活。(4)试验菌株对碱的耐受性稍强于对酸的耐受性。标准菌株ATCC29544对酸的耐受性最强,pH1.0的条件下仍具有一定的活性,ES.09、ES.10和ES.16对酸的耐受性最差,经pH2.0的酸处理即可失活；标准菌株ATCC29544、ES.05和ES.06对碱的耐受性最强,pH13.0强碱处理后仍可存活,ES.07、ES.09、ES.16对碱的耐受性最差,pH12.0短时间作用即可失活。(5)17株阪崎肠杆菌对抗生素VA、PE、OXA均表现为耐药,对CXM等15种抗生素均表现为敏感。共可分为五种耐药谱：Ⅰ型耐药谱为VA-PEN-OXA,共1株；Ⅱ型(NA中介AMP敏感)耐药谱为VA-PEN-OXA-KF,共1株；Ⅲ型(NA中介AMP中介)耐药谱为VA-PEN-OXA-KF,共1株；Ⅳ型(NA敏感AMP中介)耐药谱为VA-PEN-OXA-KF,共3株；Ⅴ型(NA敏感AMP敏感)耐药谱为VA-PEN-OXA-KF,共11株。(6)通过BLAST搜索比对,16株阪崎肠杆菌食品分离株分别与12株标准菌株具有较高同源相似性,相似性均高达99%，可确定为阪崎肠杆菌。分离株的同源性相似百分比介于100%～96.01%,ES.07和ES.08的相似性最高为100%,ES.12和ES.16的相似性最低为96.01%。构建系统发育树将阪崎肠杆菌食品分离株和模式菌株分为4个基因群,其中ES.05独成一个分支,ES.02和ES.04成另一个分支,而ES.12、ES.13和ES.14与模式菌株可归为一个基因群,其余食品分离株共同组成一个基因群。(7)17株阪崎肠杆菌试验菌株经限制性内切酶Xba Ⅰ消化后共表现为13种PFGE条带模式,酶切图谱的条数范围为14～19条,酶切条带分子量大约在10～1200Kb范围内,多集中于30～700Kb。聚类分析得Xba Ⅰ酶切13株可分型阪崎肠杆菌间的相似度介于28.6%～85.7%。其中,ES.07与ES.10的相似性最高,ES.01与ES.12的相似度最低。经限制性内切酶Spe Ⅰ消化后亦获得13种PFGE条带模式,酶切图谱的条数范围为17～24条,酶切条带分子量大约在10～1200Kb范围内,多集中于30～400Kb。聚类分析得Spe Ⅰ酶切13株可分型阪崎肠杆菌间的相似度介于43.8%～87.2%。其中,ES.04与ES.08的相似性最高,ES.11与ES.12的相似度最低。