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研究目的本研究选择肾小球足细胞上的特异蛋白podocalyxin作为足细胞的标志物,采用PE-鼠抗人podocalyxin单克隆抗体,用流式细胞仪检测尿液中podocalyxin蛋白阳性的细胞和/或细胞碎片的数目(PCX+EL),以评估糖尿病肾病患者肾小球足细胞的损伤情况,探讨PCX+EL在早期糖尿病肾病中的诊断价值。研究方法本研究共收集68例自2012年1月到10月期间在山东大学附属省立医院就诊的糖尿病肾病患者。根据尿白蛋白/肌酐比值(UACR)水平,将68例患者分成三组：正常蛋白尿组(UACR<30mg/g)21例；微量蛋白尿组(UACR30-300mg/g)25例；大量蛋白尿组(UACR>300mg/g)22例。28例健康对照为随机抽取的在2012年1月到10月期间来山东大学附属省立医院体检中心进行健康体检的健康人群。1.采用流式细胞仪,用PE-鼠抗人podocalyxin单克隆抗体,检测受检者尿液中podocalyxin蛋白阳性的细胞和/或细胞碎片(PCX+EL)的数量。2.采用免疫比浊法检测受检者血清中胱抑素C的含量,并收集受检者血肌酐的测定值。3.分析比较尿液PCX+EL、血清胱抑素C和血肌酐在糖尿病肾病患者和健康对照中的含量,以及以上三种标志物分别在糖尿病肾病患者各个分组中含量与健康对照组的比较。4.运用斯皮尔曼相关性分析法分析受检者尿液PCX+EL与尿蛋白、血清胱抑素C和血肌酐含量的相关性。5.运用非参数ROC曲线,分析比较尿液PCX+EL、血清胱抑素C和血肌酐这三种标志物对糖尿病肾病的诊断效能。研究结果1.在糖尿病肾病患者与健康对照组的比较中,糖尿病肾病患者组尿液PCX+EL(p<0.001)、血清胱抑素C(p<0.001)和血肌酐(p=0.001)的量都显著高于健康对照组。2.在各组糖尿病肾病患者中,尿液PCX+EL值在正常蛋白尿组(p<0.001)、微量蛋白尿组(p<0.001)和大量蛋白尿组(p<0.001)都高于健康对照组；血清胱抑素C的量在微量蛋白尿组(p<0.001)和大量蛋白尿组(p<0.001)比健康对照组高,而它在正常蛋白尿组(p=0.142)的量与健康对照相比无统计学意义；血肌酐仅仅在大量蛋白尿组(p<0.001)比健康对照高,而在正常蛋白尿组(p=0.117)和微量蛋白尿组(p=0.433)与健康对照相比都无统计学意义。3.相关性比较结果表明,受检者尿液PCX+EL与尿白蛋白(r=0.766,p<0.001)、血清胱抑素C(r=0.785,p<0.001)和血肌酐(r=0.436,p<0.001)都有较强的相关性。4.非参数ROC曲线分析结果表明,在诊断糖尿病肾病时,尿PCX+EL(0.966)的曲线下面积显著高于血清胱抑素C(0.857)和血肌酐(0.726)的曲线下面积。并且通过曲线下面积两两比较发现,他们之间的差异有统计学意义(Z检验,p<0.05)。根据尤登指数法,尿液PCX+EL的cutoff值为3.86arb.units/umol时,尤登指数为最大值,此时,灵敏度和特异度分别为92.6%和96.4%。结论在早期糖尿病肾病患者尿液中可检测到PCX+EL,它可能成为诊断早期糖尿病肾病的无创指标。