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目的:研究缺氧性肺动脉高压(HPH)大鼠发病过程中无肌性肺动脉肌化的细胞来源,观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与转化生长因子β1(TGF-β1)基因动态表达变化及与无肌性动脉肌化的关系,同时以人胚肺成纤维细胞为研究对象,研究缺氧和缺氧+TGF-β1对人胚肺成纤维细胞表型的影响。从而了解成肌纤维细胞在慢性阻塞性肺疾病(COPD)继发缺氧性肺动脉高压发病中的可能作用,为COPD肺动脉高压发病机制提供新的理论依据。 方法:动物模型实验:实验采用常压低氧复制HPH大鼠模型(10%O2,每天间断缺氧8小时,共21天),在缺氧3天、7天、14天和21天不同时间点及对照组用右心导管法测定大鼠平均肺动脉压(mPAP),称量法计算右心室肥大指数(RVHI),HE染色进行缺氧性肺小动脉重塑(HPSR)观察。透射电镜观察外膜成肌纤维细胞和腺泡内血管壁细胞表型。原位杂交,免疫组化检测HIF-1α、iNOS和TGF-β1在HPH进展过程中的mRNA和蛋白动态变化及相互关系及其与mPAP,HPSR、RVHI的相关关系。细胞培养实验:人胚肺成纤维细胞(KMB17)复苏后取3-4代细胞作为实验细胞。实验分组:设计常氧组N(20%O2);低氧组H(1%O2+5%CO2+平衡氮);低氧+TGF-β1组H+T(1%O2+5%CO2+平衡氮,终浓度为5ng/mL)。免疫组化检测α-SMA以确定KMB17是否发生表型转化。 结果:缺氧7天起大鼠mPAP、管壁面积/管总面积(WA%)、管腔面积/管总面积(LA%)分别为(18.41±0.37)mmHg、(52.2±0.8)%、(47.8±0.8)%与对照组(14.02±0.41)mmHg、(64.5±1.3)%、(35.5±1.3)%比较差异有显著性(P<0.05),缺氧14天起稳定于高水平;缺氧14天RVHI为(25.0±1.8)%与对照组(23.6±0.5)%比较差异也有显著性(P<0.05)。(2)从缺氧7天开始无肌型动脉、部分肌型