鸡大肠杆菌病是家禽养殖业中的常见、多发病之一。环境因素、应激反应、并发病或继发病等多种因素可以导致发病,治疗与预防多采用化学药物与抗生素,造成耐药菌株的产生,疗效大不如前,并且污染环境,最终导致禽类产品质量下降,对人类身体健康和生存环境造成恶劣影响。中草药作为天然药物类不仅来源丰富并且对动物机体起到扶正祛邪的作用,无耐药性等特点,越来越多的运用于治疗和预防动物细菌性疾病,疗效显著。根据鸡大肠杆菌病的临床表现、病理变化,按中兽医辨证论治的观点,鸡大肠杆菌病可辨证为“湿热下注膀胱”证,“八正散”是清热泻火、利水通淋的代表方,本实验按照古方中“八正散”,并按照配伍理论,加入两味中药组成了“加味八正散”,将两方剂运用于人工建立的鸡大肠杆菌病,进行病理模型药效学观察,并由此来评价鸡大肠杆菌病与“湿热下注膀胱之淋证”的相关性研究。研究目的:通过建立鸡大肠杆菌病的病理模型,采取“八正散”及其加味方对人工病理模型的药效学研究试图阐明鸡大肠杆菌病的中兽医辨证分型;并借此为中兽药治疗鸡大肠杆菌病提供一种正确的思路。研究方法:1.体外抑菌试验:以试管二倍稀释法和牛津杯法测定“八正散”、“加味八正散”对大肠杆菌的体外抑菌作用。2.鸡大肠杆菌病理模型的建立:将108只两周龄地方鸡随机分为9组,分别以原细菌培养液、10-2、10-4稀释液为攻毒液腹部皮下注射攻毒,每个稀释度分1ml、0.5ml、0.25ml三个剂量,接种后观察各组实验鸡的精神、采食、饮水、粪便、呼吸等临床情况;对死亡鸡进行病理剖检,取肝脏做细菌分离培养。观察48小时,记录死亡情况。以发病率100%,72h死亡率70%为标准确定攻毒浓度和剂量。3.药效学试验:将90只两周龄地方鸡随机分6组,A组为健康对照组,不造模,不治疗;B组为病理对照组,只造模,不治疗;C组为八正散组,造模,八正散浓度为75mg/ml,给药治疗5天;D组为加味八正散组,加味八正散浓度为75mg/ml,给药治疗5天;E组为黄连解毒汤组,黄连解毒汤浓度为50mg/ml,给药治疗5天;F组为氟苯尼考对照组。收集、剖检病死鸡,对组织器官的病理变化进行拍照,制作组织切片。4.“八正散”及其加味对鸡大肠杆菌病血浆中自由基及血尿酸的影响:与药效学实验同步进行,于给药后的0h、38h、72h采血,测定血浆中SOD值、MDA值、血尿酸含量。研究结果:1.体外抑菌试验测得:“八正散”、“加味八正散”对大肠杆菌的MIC值分别为:1000～750mg/ml、1000mg/ml以上。抑菌圈结果为:均未见明显抑菌圈。2.鸡大肠杆菌病理模型的建立:腹部皮下接种10~5—10~6CFU/mL大肠杆菌,0.5ml/100g。3.药效学试验结果:“八正散”、“加味八正散”用于治疗鸡大肠杆菌病显著提高存活率(P＜0.05);“八正散”、“加味八正散”对鸡大肠杆菌病造成的组织病变有明显的保护作用。4.“八正散”、“加味八正散”对自由基的影响结果:B组造模后SOD值持续下降,MDA值持续上升,与健康对照组(A组)差异显著(P＜0.05)。“八正散”、“加味八正散”治疗组(C组、D组)SOD值持续上升,MDA值下降。“八正散”、“加味八正散”对血尿酸含量影响的结果:病理对照组(B组)造模后血尿酸含量持续上升,与健康对照组(A组)差异显著(P＜0.05)。“八正散”、“加味八正散”治疗组(C组、D组)血尿酸含量持续下降。结论:1.根据鸡大肠杆菌病的临床症状和病理变化特点,本实验以中兽医的观点,将其辨证为“湿热下注膀胱”证,运用利水通淋的代表方剂“八正散”及其加味对鸡大肠杆菌病治疗,显示了良好的药效学作用,以此判断本实验对鸡大肠杆菌病的辨证论治的观点是正确的,即为鸡大肠杆菌病辨证为“湿热下注膀胱”进行相应的治疗是行之有效的。2.实验结果表明,“八正散”、“加味八正散”对鸡大肠杆菌的治疗机制并非通过直接杀灭或者抑制大肠杆菌本身,而是“八正散”、“加味八正散”可以提高机体清除自由基的能力,降低脂质过氧化程度;“八正散”、“加味八正散”可以增强血尿酸代谢功能,降低机体内尿酸盐的沉积。