【摘 要】
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目的:乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤之一,呈逐年上升趋势。目前,对于乳腺癌还没有较好的诊断方法。肿瘤标志物检测在乳腺癌的早期诊断、治疗方案选择、病情观察和转移监
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目的:乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤之一,呈逐年上升趋势。目前,对于乳腺癌还没有较好的诊断方法。肿瘤标志物检测在乳腺癌的早期诊断、治疗方案选择、病情观察和转移监测、疗效评价以及群体随访观察和普查等方面有重要意义。酪氨酸激酶是在乳腺组织细胞的信号传导中起关键作用的一种蛋白质,与肿瘤的生长和发展密切相关。近来发现一种新的酪氨酸激酶Syk(Spleen tyrosine kinase)是乳腺癌细胞生长和转移中重要的抑制因子。然而,Syk在乳腺癌发生发展中的作用机理等未明确。本研究从转染syk基因的细胞中提取、纯化了Syk蛋白,常规免疫家兔制备抗Syk抗体,应用免疫组化法检测不同个体正常乳腺组织和乳腺癌组织中Syk蛋白的表达;应用RT-PCR方法测定其syk基因表达的差异,以探讨Syk在乳腺癌的发生、发展及预后的作用及其作用机理,为乳腺癌的早期诊断、制定合理经济的治疗方案及预后评价提供理论依据。 方法 1Syk蛋白的提取和纯化:将syk基因转染Sf21细胞,于28℃培养48h,收集细胞,用超声波破碎仪裂解细胞,提取裂解液中总蛋白,用Yellow-3凝胶和Toyopearl-AF-Heptin-650M凝胶层析柱分离、纯化Syk蛋白。层析液中Syk蛋白的存在和性质,用SDS-PAGE、免疫印迹
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