第一部分p54^nrb/NONO通过SREBP-1a调节脂质代谢促进乳腺癌增殖机制的研究目的:研究p54^nrb/不含POU结构域的八聚核苷酸结合蛋白（non-POU-dormain-containing octamer-bindingprotein,NONO）通过胆固醇调节元件蛋白（Sterol regμlatory element-binding proteins-1a,SREBP-1a）调节脂质代谢,促进乳腺癌增殖的分子机制。方法:应用免疫组化检测p54^nrb/NONO和SREBP-1蛋白在乳腺癌组织中表达情况,统计分析两种蛋白表达在乳腺癌中的相关性。通过GST融合蛋白沉降技术（Glutathione-S-transferase-pull down,GST-pull down）、免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation,Co IP）和荧光共定位等分子生物学技术筛选并验证p54^nrb/NONO与SREBP-1a相互结合及其位点,明确p54^nrb/NONO蛋白表达变化在SREBP-1a蛋白功能变化中的作用;并分别通过体外细胞学实验和体内裸鼠成瘤实验探讨p54^nrb/NONO与SREBP-1a相互作用在脂质代谢调节及乳腺癌细胞增殖等生物学功能中的作用。结果:核蛋白p54^nrb/NONO在乳腺癌组织中比癌旁组织高表达,并和SREBP-1a蛋白水平正相关。p54^nrb/NONO和SREBP-1a存在相互作用,其中Y267是p54^nrb与SREBP-1a结合的关键位点。p54^nrb/NONO与核蛋白SREBP-1a结合增加了核蛋白SREBP-1a的稳定性。在乳腺癌中,p54^nrb/NONO促进SREBP-1a介导的脂质合成基因转录和脂质产物生成,促进体外乳腺癌细胞增殖和体内乳腺癌肿瘤生长。结论:p54^nrb/NONO与SREBP-1a结合促进了脂质合成和乳腺癌肿瘤增殖。第二部分辛伐他汀调节p54^nrb/NONO表达抑制乳腺癌细胞增殖目的:探讨p54^nrb/NONO表达在辛伐他汀抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖及其可能的作用机制。方法:通过p54^nrb/NONO基因的特异性小干扰RNA片段(si RNA-p54^nrb)和p54^nrb过表达质粒(pc DNA4/TO-p54^nrb)转染技术分别建立低表达和高表达p54^nrb/NONO乳腺癌MCF-7细胞株。应用细胞计数方法分别检测辛伐他汀作用后MCF-7乳腺癌细胞、低表达和高表达p54^nrb/NONO MCF-7乳腺癌细胞株的增殖情况。应用实时荧光定量PCR和western blot分别检测辛伐他汀作用后MCF-7乳腺癌细胞、低表达和高表达p54^nrb/NONO MCF-7乳腺癌细胞株p54^nrb的m RNA和蛋白的表达水平、HMGCR的m RNA水平和利用组织总胆固醇酶法测定胆固醇含量变化。结果:si RNA-p54^nrb转染组MCF-7细胞中p54^nrb m RNA及蛋白的表达水平显著下降（p<0.01）,过表达pc DNA4/TO-p54^nrb组,p54^nrb m RNA及蛋白表达水平显著升高（p<0.01）。辛伐他汀（20μM）有效地抑制MCF-7细胞增殖（p<0.05）;辛伐他汀作用MCF-7细胞后,p54^nrb的m RNA和蛋白表达水平明显降低（p<0.05）;转染si RNA-p54^nrb下调p54^nrb表达,MCF-7细胞增殖受到明显抑制（p<0.05）,过表达p54^nrb蛋白促进了乳腺癌MCF-7细胞增殖（p<0.05）;MCF-7细胞中过表达p54^nrb的同时联合辛伐他汀作用48h后,辛伐他汀可取消p54^nrb过表达引起的细胞增殖作用,使细胞增殖率与对照组相比,差异无统计学意义（p>0.05）;si RNA-p54^nrb转染组MCF-7细胞中HMGCR的m RNA水平和胆固醇水平显著下降（p<0.01）。结论:乳腺癌MCF-7细胞中,辛伐他汀通过抑制p54^nrb的表达而抑制MCF-7细胞的增殖。