山多益生素的制备与作用研究

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为了合理地利用益生菌与中药提取物,解决生产中应用益生菌遇到的疑惑。本研究采用表型特征和PCR技术鉴定益生菌,通过体外抑菌试验、传代培养试验、细菌生长曲线和活菌数计数试验,筛选并优化益生菌的培养,制备益生菌粉剂,与中药提取物联合创制复合益生素产品,并用小鼠检测其安全性、用宏基因组测序技术监测产品质量、用短期动物试验初步探究产品的作用,结果如下:1.从7株益生菌中筛选出2种益生菌:枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。2.枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌优化培养:基础营养为胰蛋白胨大豆肉汤,枯草芽孢杆菌添加1%蛋白胨、3%葡萄糖和0.3%磷酸二氢钠,地衣芽孢杆菌添加1%蛋白胨、1%葡萄糖和0.1%磷酸二氢钠。3.枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌粉剂的制备条件:96%玉米淀粉,4%泊洛沙姆,40℃热烘干。4.山多益生素的制备:山豆根多糖0.1%,地衣芽孢杆菌菌粉与枯草芽孢杆菌菌粉质量比例为1:1。5.山多益生素的监测:对小鼠无毒副作用;宏基因组测序显示产品制备前后益生菌的含量比例无明显变化(P>0.05)。6.山多益生素的作用:4周内可提高三黄鸡超氧化物歧化酶(SOD)的活力和提高新城疫病毒(NDV)的抗体滴度(P<0.05);山多益生素试验组鸡只免疫器官发育数据比空白对照组鸡只高,但生物统计结果显示无显著差异(P>0.05);对三黄鸡的增重无明显作用(P>0.05);可保护肠道菌群,规避氨苄西林对肠道菌群的破坏,但保护效果不明显(P>0.05)。结论:1.4%泊洛沙姆为保护剂的低温热干燥法制备地衣与枯草芽孢杆菌菌粉方法可行。2.宏基因组测序技术结合活菌数计数方法共同监测益生菌产品质量,可以达到既定性又定量的效果。3.山豆根多糖可与地衣、枯草芽孢杆菌联合应用,该复合产品4周内能提高三黄鸡抗氧化能力和增强体液免疫功能,对三黄鸡的生长无影响,对已经被破坏的肠道菌群有无恢复作用需要长期的反复试验验证。
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