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目的:缺血性疾病是当今导致人类死亡主要病因，尽管血管外科开放手术及腔内治疗已取得长足进展，很大程度改善了患者预后，但其远期疗效仍然令人堪忧，因为几乎所有患者都难以避免因血管重塑导致的再狭窄发生。由此探究血管重塑机制具有重要意义。但自传统血管外科开放手术时代至今日的腔内时代，血管负性重塑问题一直是临床治疗的难点，其甚至被称作为“血管外科医生的挑战”。血管负性重塑的主要机制是，生理状态下静默的血管平滑肌细胞被活化，导致血管平滑肌细胞异常增殖，进而新生内膜形成。因此，探索血管平滑肌细胞增殖的病理生理学机制是解决血管负性重塑问题的关键。近年来，研究证实微小RNA(microRNAs，miRNA)、长链非编码RNA(long noncoding RNA，LncRNA)等非编码RNA对生理状态维持和疾病发生发展均有重要作用，逆转了过去认为非编码RNA无用的错误认知。研究表明尤其是LncRNA、miRNA具有很强的基因调控功能，其参与转录、翻译及蛋白降解过程。长链非编码RNAH19(LncRNAH19)发现于1984年，于1992年证明人类亦存在该基因，2007年进一步发现LncRNAH19是miR-675的前体基因。LncRNAH19多在胚胎或肿瘤组织中高表达，因此被称作“癌基因”。新近研究发现，非编码RNA的功能具有细胞/组织特异性，因此本研究旨在探讨LncRNAH19在血管平滑肌细胞中的功能及其在血管重塑中的角色。 方法:为了研究LncRNAH19与血管负性重塑的关系，我们建立了大鼠颈动脉球囊损伤模型，并检测了负性重塑的模型血管中LncRNAH19和miR-675的表达。为进一步研究LncRNA H19的功能，我们于人胸主动脉平滑肌细胞系T/GHA-VSMC中过表达LncRNAH19，由于LncRNAH19可内源性产生miR-675，因此他们提出了LncRNA H19的生物学功能是由产生miR-675介导的。为了验证这一假说，我们运用生物信息学软件RNAhybrid和DIANA分析miR-675可能作用的靶基因，并用双萤光素酶报告基因分析法加以验证。为了进一步确定LncRNA H19的生物学功能是依赖于miR-675的，我们进行了回复实验，即在LncRNA H19过表达的T/G HA-VSMC细胞中沉默miR-675，观察LncRNA H19对血管平滑肌细胞的生物学功能是否随着miR-675的沉默而变化。慢病毒感染和miRNA转染用于调控LncRNA H19和miR-675表达;T/G HA-VSMC增殖能力 通过CCK-8实验、Brdu掺入实验及检测PCNA评价;运用流式细胞仪检测细胞周期分布;蛋白质免疫印迹法检测蛋白表达量变化，以实时荧光定量PCR检测各类RNA的表达情况。实验结果均用均值±标准差表示，两组间比较运用t检验，多组间两两比较使用单因素方差分析。当P＜0.05时认为有显著统计学差异。统计学处理软件运用SPSS23.0和GraphPad Prism7完成。 结果:成功建立大鼠颈动脉球囊损伤模型，术后1周、3周可见新生内膜逐渐增厚;原位杂交法检测发现LncRNA H19和miR-675表达量随着新生内膜增厚而增加，Pearson相关分析证实LncRNA H19和miR-675表达量均与新生内膜厚度正相关。CCK-8实验证实过表达LncRNAH19后，显著促进了T/G HA-VSMC细胞增殖，而运用蛋白质免疫印迹法检测细胞增殖指标PCNA的表达，亦发现过表达LncRNA H19后显著上调了PCNA的表达，而Brdu掺入实验也发现，LncRNA H19过表达组其增殖细胞数量显著增加，进一步分析细胞周期，发现过表达LncRNA H19促使细胞S期、G2/M期细胞比例增加;综上证明LncRNA H19具有促进血管平滑肌细胞增殖功能。此外，生物信息学预测结果提示PTEN可能是miR-675的靶基因，依据生物信息学预测得到的结合位点构建双萤光素酶质粒，发现miR-675 mimics显著抑制了野生型质粒的萤光素酶活性，而对突变型质粒的萤光素酶活性无显著抑制效应。进行回复实验时，RT-qPCR证实于过表达LncRNA H19的T/G HA-VSMC细胞中转染miR-675抑制剂miR-675 inhibitor，可显著降低miR-675的表达，但不影响LncRNA H19的表达，在此基础上检测PTEN、p-AKT、PCNA的表达量变化，结果证实LncRNA H19对上述蛋白的调控作用可随着miR-675的抑制而被削弱。 结论:LncRNA H19及miR-675表达量与新生内膜形成厚度正相关;LncRNAH19具有促进血管平滑肌细胞增殖功能;LncRNA H19内源性生成的miR-675可靶向抑制PTEN;LncRNA H19促进血管平滑肌细胞增殖的作用是部分由miR-675介导的。上述结果将长链非编码RNA、微小RNA以及蛋白编码RNA串联起来，深入阐释了LncRNAH19在血管平滑肌细胞中的角色及作用机制，为再狭窄及其他血管负性重塑疾病的诊疗提供了新思路。