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目的：1.观察黄芪多糖(Astragalus Polysaccharides,APS)体外干预培养对大鼠骨髓源性内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells,EPCs)数量、迁移、黏附、增殖、周期分布及分化的影响。2.观察APS体外干预大鼠骨髓源性EPCs共培养对人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)增殖的影响。方法：1.取雄性Wistar大鼠予以水合氯醛腹腔注射麻醉,脱颈处死,将其股骨、胫骨、胸骨、肱骨取出,用PBS缓冲液冲洗骨髓腔,采用密度梯度离心法分离大鼠骨髓源性单个核细胞,培养7天以后收集贴壁细胞。采用多波长激光共聚焦显微镜对贴壁细胞进行鉴定,采用流式细胞术检测贴壁细胞的表型。收集大鼠骨髓源性EPCs,将其随机分为6组：设立对照组；其他组为APS各浓度组(共5组),于DMEM(低糖)培养基中加入终浓度为0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、 0.4mg/ml、0.8mg/ml的APS培养24h,其中APS浓度为0.4mg/ml组予以不同时间(Oh、6h、12h、24h、48h)进行培养。倒置显微镜观察每组大鼠骨髓源性EPCs并进行计数；Transwell小室培养检测大鼠骨髓源性EPCs的迁移数量；黏附能力实验检测大鼠骨髓源性EPCs的黏附数量；MTT增殖实验检测大鼠骨髓源性EPCs的增殖；流式细胞术检测大鼠骨髓源性EPCs的细胞周期的分布和分化。2.分离培养大鼠骨髓源性EPCs,7天后收集贴壁细胞,取样进行染色和流式鉴定,待细胞表达符合标准后,建立Transwell共培养体系,设立对照组,将大鼠骨髓源性EPCs与HUVEC予以DMEM(低糖)培养基共培养,并予以APS各浓度(0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.8mg/ml)干预共培养24h后,MTT增殖实验检测APS各浓度干预共培养后HUVEC的增殖；其中APS浓度为0.4mg/ml组予以干预共培养不同时间(Oh、6h、12h、24h、48h),MTT增殖实验检测共培养各时间点HUVEC的增殖。结果：(1)APS体外干预培养对大鼠骨髓源性EPCs数量的影响：APS能明显增加大鼠骨髓源性EPCs的数量,并且呈一定的量效和时效关系,APS浓度为0. Olmg/ml时,其数量较对照组开始增加(P<0.05),APS浓度为0.4mg/ml时达到最佳效应(P<0.01)；APS浓度为0.4mg/ml干预培养12h后,其数量明显增加(P<0.01),24h达到最佳效应(P<0.01),48h稍有下降,但仍然优于对照组(P<0.01)。(2)APS体外干预培养对大鼠骨髓源性EPCs迁移能力的影响：APS能明显提高大鼠骨髓源性EPCs的迁移能力,并且呈一定的量效和时效关系,AAPS浓度为0.1mg/ml时,其迁移数量较对照组开始增加(P<0.05),APS浓度为0.4mg/ml时达到最佳效应(P<0.01);APS浓度为0.4mg/ml干预培养6h后,其迁移数量开始增加(P<0.05),24h达到最佳效应(P<0.01),48h稍有下降,但仍然优于对照组(P<0.01)。(3)APS体外干预培养对大鼠骨髓源性EPCs增殖能力的影响：APS能明显提高大鼠骨髓源性EPCs增殖的能力,并且呈一定的量效和时效关系,APS浓度为0.05mg/ml时,其增殖能力较对照组开始增加(P<0.05),APS浓度为0.4mg/ml时达到最佳效应(P<0.01);APS浓度为0.4mg/ml干预培养6h后,其增殖能力开始增加(P<0.05),24h达到最佳效应(P<0.01),48h稍有下降,但仍然优于对照组(P<0.01)。(4) APS体外干预培养对大鼠骨髓源性EPCs周期分布的影响：APS浓度为0.1mg/ml时,G0/G1期大鼠骨髓源性EPCs的比例开始减少(P<0.05),而S期和G2期的大鼠骨髓源性EPCs比例开始增加(P<0.05),APS浓度为0.4mg/ml时达最佳效应(P<0.01)。(5) APS体外干预培养对大鼠骨髓源性EPCs分化的影响：APS浓度为0.2mg/ml时开始促进大鼠骨髓源性EPCs向内皮细胞系方向分化,其表达单核/巨噬细胞表而标志(CD14+和CD64+)细胞百分比与对照组相比降低(P<0.05或P<0.01),而内皮细胞特异性标志(vWF+)细胞百分比与对照组相比升高(P<0.05),APS浓度为0.4mg/ml时达最佳效应(P<0.01)。(6)Transwell间接共同培养条件下APS干预大鼠骨髓源性EPCs对HUVEC增殖能力的影响：在APS不同浓度和不同时间体外干预下呈一定的量效和时效关系。APS体外干预培养HUVEC与对照组相比HUVEC增殖能力明显增加(P<0.01)；大鼠骨髓源性EPCs和HUVEC共培养与对照组相比HUVEC增殖能力增加(P<0.01);APS体外干预大鼠骨髓源性EPCs和HUVEC共培养与APS体外干预培养HUVEC相比HUVEC增殖能力明显增加(P<0.01)。APS (0.4mg/ml)干预大鼠骨髓源性EPCs共培养不同时间与对照组相比HUVEC增殖能力增加(P<0.05或P<0.01),而且呈一定的时间依赖性,于24h达到最佳效应。结论：(1)APS体外干预大鼠骨髓源性EPCs能增加其数量,促进其迁移、黏附、增殖,且呈一定的浓度及时间依赖性。(2)APS体外干预大鼠骨髓源性EPCs能使其G0/G1期的细胞比例减少,而S期和G2期细胞比例增加。(3)APS体外干预大鼠骨髓源性EPCs能使其表达的单核/巨噬细胞表而标志(CD14+、CD64+)细胞百分比降低,内皮细胞特异性标志(vWF+)细胞百分比明显升高。(4)APS体外干预大鼠骨髓源性EPCs与HUVEC共培养能明显促进HUVEC的增殖,且呈一定的浓度及时间依赖性变化。