近年来,新抗筛选及其生物合成机制的不断揭示为代谢途径的改造提供了丰富的信息资源,这对于人们克服因抗生素滥用导致的病原菌耐药性具有重要意义。BagremycinA和B是由Streptomyces sp. Tu4128生产的两种抗生素,能抑制一些革兰氏阳性细菌和真菌的生长,且呈一定程度的抗肿瘤活性,因而具有潜在的应用价值。在本研究中,首先我们利用框内敲除(in-frame deletion)技术分别获得了疑似Bagremycin生物合成基因bagH、bagl和bagM的敲除株,并在DNA水平和RNA水平上得以验证。HPLC/TOF-MS结果显示,bagl基因与Bagremycin的生物合成相关,用bagl基因回补敲除株可以使其恢复Bagremycin的生产；而bagH和bagM基因则不相关。其次,在探索敲除株对次级代谢影响的过程中,我们借助扫描电子显微镜(SEM)发现：与野生株相比,bagl敲除株菌丝生长和孢子发育延缓,色素产量减少；而过表达株中Bagremycin A和Bagremycin B的产量则比野生株分别高出2.5倍和2.6倍。另外,利用实时荧光定量PCR (Q-PCR)技术筛查出了bagI基因敲除株中转录差异的基因,结果暗示bagI基因在Bagremycin生物合成途径中可能以转录激活子的角色发挥作用；NCBI比对结果(SARP家族转录激活子,51%一致性)和基因序列分析同样支持上述观点。最后,我们实现了bagI基因的异源表达,Western blot验证了这一点；在此基础上对BagI蛋白进行了体外阻滞实验(EMSA),虽然没有达到预期的结果,但对于我们认识BagI蛋白功能的发挥起到了一定的暗示作用。