论文部分内容阅读
随着人们生活节奏的加快,生活压力也越来越大,继而导致了越来越多的人患上心肌梗塞,肝硬化等疾病。因此每年都有大量的人死于肝病(如肝癌、肝硬化)和心脏病(如冠心病等)。肝癌和冠心病更是严重的威胁了人类的健康。肝病和心脏病的通常采用的治疗手段是肝移植和心脏支架。目前使用的各种支架都有各自的弊端,因此寻找一种各方面都较好的支架材料迫在眉睫。木素-碳水化合物复合体(Lignin-carbohydrate complexes,LCC)具有良好的两亲性、生物相容性、无毒性、可降解性等特性,是一种很好的医用高分子材料。本研究对LCC在组织工程支架中的应用进行了研究。本文从以不同球磨时间(48h和72h)下制得的杨木的水不溶部分LCC-48和LCC-72,在聚乙二醇缩水甘油醚存在下,由上述LCC制备的干凝胶多孔载体。FT-IR光谱表明两种LCC样品由木素和多糖组成,并且显示典型的LCC结构。LCC-48和LCC-72的半乳糖含量分别为3.02%和5.67%,表明LCC-72更容易被人肝细胞识别。LCC-48和LCC-72分子量分别为9836和7153。LCC-48和LCC-72基多孔载体比表面积为26.311 m~2/g、21.263 m~2/g它们的孔径分别为29.627nm和23.812 nm。将上述干凝胶多孔载体用于人肝细胞L-02,随着球磨时间的延长,LCC制成的多孔材料的孔隙率和孔径随之下降。通过倒置显微镜、SEM观察发现大量的肝细胞粘附在多孔载体上。在LCC-72基载体上生长的肝细胞优于LCC-48基载体和对照组。细胞体外培养的白蛋白分泌量、血尿素氮分泌量以及葡萄糖消耗量的测定表明LCC-72的结果优于LCC-48和空白样。以LCC-48、LCC-72以及NCC为原料,通过液氮冷冻制备复合球形载体,通过红外光谱、SEM等实验对球形载体形态及组分进行分析,然后通过人体肝细胞L-02培养,对培养的细胞进行倒置显微镜观察、细胞计数、SEM观察,并检测其细胞的代谢活性。结果表明复合球形载体具有典型的木素和聚糖复合物的结构,LCC-72/NCC复合球形载体和LCC-48复合球形载体的比表面积分别为24.262 g/m~2和28.938 m~2/g,它们的孔径分别为28.617nm和33.565 nm,通过倒置显微镜、SEM观察表明大量的肝细胞粘附在多孔载体上。在LCC-72/NCC基复合球形载体上生长的肝细胞优于LCC-48/NCC基复合球形载体和对照组。细胞体外培养的白蛋白分泌量,血尿素氮分泌量以及葡萄糖消耗量的测定结果表明LCC-72/NCC球形复合载体的生物相容性优于LCC-48/NCC球形复合载体和空白组,且在LCC/NCC球形载体中其生物相容性随LCC含量的增加而提高,当LCC含量为超过50%,LCC/NCC生物相容性不再随LCC含量的变化而变化。以LCC-48、LCC-72以及CNF为原料,通过流延成膜法和卷曲成型法制备复合管状载体,并对形态进行分析,然后通过人体冠状动脉内皮细胞的体外培养,对培养的细胞进行倒置显微镜观察、细胞计数、SEM观察,并检测其细胞活性。结果表明LCC-72/CNF复合管状载体和LCC-48/CNF复合管状载体的比表面积分别为3.497 m~2/g、3.956 m~2/g,它们的孔径分别为8.302nm、9.001 nm,通过倒置显微镜、SEM观察表明大量的人心脏冠状动脉内皮细胞粘附在多孔载体上。在LCC-72/CNF复合管状载体上生长的肝细胞优于LCC-48/CNF基载体以及对照组。细胞体外培养的白蛋白分泌量,血尿素氮分泌量以及葡萄糖消耗量的测定结果表明LCC-72/CNF管状复合载体的生物相容性优于LCC-48/CNF管状复合载体和空白样生物活性,且在LCC/CNF球形载体的生物相容性随LCC含量的增加而提高,当LCC含量为超过60%,LCC/CNF生物相容性不再随LCC含量的变化而变化。