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目的:检测不同分级OA患者成纤维样滑膜细胞中COX-2mRNA的表达水平的差异,为进一步研究COX-2炎症途径在OA发生、发展的作用提供可靠的理论依据。
方法:收集收集膝骨关节炎患者病变滑膜44例(根据Kellgren和Lawrence的X线诊断标准:Ⅰ-Ⅱ级15例;Ⅲ级14例;Ⅳ级15例),以及非膝骨关节炎关节滑膜12例(单纯半月板损伤、前交叉韧带损伤、外伤);(1)成纤维样滑膜细胞原代培养至四代的成纤维样滑膜细胞(FLS)用于实验,(2)使用实时荧光定量(RT-PCR)检测OA患者和非OA患者膝关节成纤维滑膜细胞中的COX-2mRNA的表达水平。所用资料应用SPSS18.0统计软件进行统计学分析,以α=0.05作为检验标准。
结果:(1)COX-2mRNA在所有的膝关节成纤维样滑膜细胞中都能检测到。(2)与非OA相比,COX-2mRNA在OA患者膝关节成纤维样滑膜中的表达明显上升(P<0.05)。(3)采用2-△△Ct进行相对表达量分析,COX-2mRNA在非OA成纤维样滑膜细胞中的表达量[1.0(0.9-1.1)],OA早期组细胞中的表达量[5.3(5.1-5.6)]、中期组[3.7(3.4-3.9)]、晚期组[4.2(3.7-4.7)];OA三期的表达量分别是配对非OA表达量的5.3、3.7和4.2(均P<0.05);在OA组间,早期组是中期组的1.4倍(P<0.05)、晚期组的1.3倍(P<0.05),中期组与晚期组两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。
结论:(1)人膝关节成纤维样滑膜细胞均存在COX-2mRNA,并可通过实时荧光定量PCR进行检测。(2)COX-2mRNA在早期(Ⅰ-Ⅱ级)骨性关节炎患者膝关节成纤维样滑膜细胞表达水平最高;中、晚期表达水平相当,与骨关节炎分期不成正负关系;COX-2mRNA可能是骨关节炎炎症途径的发生、发展过程中的一个潜在的启动因子,且主要起作用于OA早期。