灿烂弧菌胁迫下不同选育品种(系)刺参响应环境因子变化的生态适应性差异

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刺参又称仿刺参,食用和药用价值极高。我国刺参养殖业进入本世纪后得到快速发展。然而刺参产业受到以腐皮综合征(主要细菌性病原为灿烂弧菌)为重要疫病的病害、良种缺乏以及养殖环境变化等影响,限制了该产业的可持续发展。本研究以“参优1号”刺参新品种、“青青1号”刺参新品系、中俄正交品系与中俄反交品系等为研究对象,选取温度、盐度等重要环境因子为变量参数,测定灿烂弧菌胁迫下刺参不同选育品种(系)在不同环境因子下的生长存活、呼吸代谢强度、免疫酶活性、消化酶活性及肠道菌群结构变化,探究灿烂弧菌胁迫下刺参不同选育品种(系)对典型环境因子的适应性,并分析其适应机制。主要研究结果如下:1.灿烂弧菌胁迫下不同选育品种(系)刺参响应温度变化的生态适应性差异本研究设置温度对照组(温度梯度为22℃、24℃、26℃、27℃、29℃)及实验组(各温度梯度加入1×10~5CFU/m L灿烂弧菌侵染),探究灿烂弧菌胁迫下不同选育品种(系)刺参响应温度变化的适应性差异,比较不同选育品种(系)生长温度耐受阈值,分析其适应机制。结果表明,灿烂弧菌胁迫下不同品种(系)刺参应对温度变化的适应能力存在差异。依据4种刺参实验生长结果得到温度变化下特定生长率(Specific Growth Rate,SGR)的非线性回归方程,以SGR为0时的温度作为生长温度耐受阈值。刺参“参优1号”、“青青1号”、中俄正交品系及中俄反交品系最高生长温度分别为24.8℃、24.1℃、24.7℃和23.8℃。灿烂弧菌胁迫下温度升高会降低4种品种(系)刺参存活率(Survival Rate,SR)及SGR。在29℃时,“参优1号”SR与SGR分别为74.44%和-2.639%/d,中俄反交品系刺参SR与SGR分别为62.22%和-3.707%/d,差异显著(P<0.05)。呼吸代谢测定结果显示,灿烂弧菌胁迫下“参优1号”与“青青1号”耗氧率在27℃时最高,2种中俄杂交品系在29℃时最高。灿烂弧菌胁迫下的温度变化对4种品种(系)刺参O:N影响较小,均低于10。灿烂弧菌胁迫下,4种刺参SOD与LZM受温度影响较小;刺参中俄反交品系ACP活性在29℃时显著降低(P<0.05),其余3种刺参在24℃时显著降低(P<0.05);“参优1号”与中俄反交品系AKP活性出现下降,其余2种刺参AKP变化较小。灿烂弧菌胁迫下温度升高会导致4种刺参消化酶活性降低,其中刺参“参优1号”与“青青1号”胰蛋白酶活性在26℃时显著降低(P<0.05),2种中俄杂交品系在24℃时显著降低(P<0.05);同一温度下,中俄杂交品系淀粉酶活性低于其余2种刺参。灿烂弧菌胁迫下,刺参“参优1号”肠道中拟杆菌门、厚壁菌门、Prevotella_9属与粪杆菌属占比升高,变形菌门占比降低,与其余3种刺参相比差异显著(P<0.05)。结果显示灿烂弧菌胁迫下温度升高会降低刺参非特异性免疫酶活性、消化酶活性以及改变肠道菌群结构从而抑制4种品种(系)刺参生长存活。2.灿烂弧菌胁迫下刺参不同选育品种(系)响应盐度变化的生态适应性差异。本研究设置对照组(盐度梯度为20、24、28、32、36)及实验组(各盐度梯度加入1×10~5CFU/m L灿烂弧菌侵染)测定灿烂弧菌胁迫下不同选育品种(系)刺参响应盐度变化的生长存活、呼吸代谢强度、非特异性免疫酶活性、消化酶活性及肠道菌群结构变化,比较不同选育品种(系)盐度适宜范围,并分析其适应机制。结果表明,不同品种(系)刺参对盐度、灿烂弧菌胁迫的适应性存在差异。依据4种刺参实验生长结果得到盐度变化下SGR的非线性回归方程,以SGR最高时的盐度作为最适生长盐度。刺参“参优1号”适宜生长盐度为24~36,最适生长盐度为32.3;刺参“青青1号”适宜生长盐度为20~36,最适生长盐度为30.6;中俄正交品系适宜生长盐度为20~36,最适生长盐度为30.6;中俄反交品系适宜生长盐度为24~36,最适生长盐度为31.3。在20盐度时,“参优1号”、“青青1号”、中俄正交品系、中俄反交品系刺参SR分别为87%、88%、88%、68%,SGR分别为-0.206%/d、-0.316%/d、-0.328%/d、-0.522%/d,中俄反交刺参SR与SGR显著低于其余3种刺参(P<0.05)。灿烂弧菌胁迫下刺参“参优1号”最适生长盐度显著升高到37.2(P<0.05),其余3种刺参的最适盐度无明显变化。灿烂弧菌胁迫下4种品种(系)刺参呼吸代谢强度分别在盐度32、28、28、32时较低,灿烂弧菌胁迫下“参优1号”、“青青1号”、中俄正交品系O:N比值均小于10,中俄反交品系在28~36盐度时小于10。灿烂弧菌胁迫下4种品种(系)刺参的ACP、AKP与LZM活性随盐度升高变现为先升高后降低再升高,SOD活性呈现倒“V”型变化。4种刺参SOD活性分别在盐度32、28、28、32时达到最高值。灿烂弧菌胁迫下4种品种(系)刺参的胰蛋白酶及淀粉酶活性随盐度升高呈现先升高后下降的现象,同一盐度下,2种中俄杂交品系消化酶活性低于其余2种刺参。灿烂弧菌胁迫下低盐度时4种刺参肠道菌群结构无明显变化,高盐度时4种刺参肠道菌群结构发生较大变化。其中刺参“参优1号”、“青青1号”及中俄正交品系肠道乳酸杆菌属占比下降,Rhodobacteraceae属显著升高(P<0.05)。研究发现灿烂弧菌胁迫下盐度变化会通过影响刺参非特异性免疫酶活性、消化酶活性以及肠道菌群结构从而影响4种品种(系)刺参的生长存活。综合来看,刺参“参优1号”对温度变化及抗灿烂弧菌侵染的适应性较强,对低盐度适应性较弱;“青青1号”对盐度变化的适应性较强,对温度变化和高温时抵抗灿烂弧菌侵染的适应性较弱;中俄正交品系对盐度变化及温度变化适应性较强,抵抗灿烂弧菌侵染适应性较差;中俄反交品系对盐度、温度变化及灿烂弧菌侵染适应性较弱。研究结果可为科学指导良种养殖布局和提升良种增产贡献率提供理论基础。
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