论文部分内容阅读
硝基咪唑类药物曾广泛用于预防和治疗由细菌和原虫感染引起的禽类黑头病以及猪的密螺旋体痢疾,因该类药物有致突变性和潜在致癌性,许多国家都不允许在动物性食品中残留。目前国外已有定量定性检测方法,但我国大陆只有定量没有定性方法。本研究旨在建立猪肌肉、脂肪、肝脏和肾脏中羟基地美硝唑（HMMNI）、洛硝唑（RNZ）、甲硝唑（MNZ）、替硝唑（TNZ）、地美硝唑（DMZ）、奥硝唑（ONZ）和噻克硝唑（SNZ）多残留的高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱串联质谱（GCMS/MS）确证检测法。 HPLC法样品中硝基咪唑类药物用二氯甲烷提取,盐酸反萃取。盐酸溶液用K2HPO4碱化,再用二氯甲烷反萃取,萃取液于40℃水浴中旋转真空蒸干。残余物用流动相0.5mL溶解,进样分析。色谱柱为Hypersil ODS2,紫外检测器,检测波长320nm。以甲醇-水（14:86,v/v）为流动相,进样量20μL。结果表明,6种药物标准液浓度在0.005～2μg/mL时,与响应值呈良好线性关系,相关系数均大于0.996。HMMNI、RNZ和MNZ在肌肉和脂肪组织中检测限和定量限均可达0.5μg/kg,在肝脏和肾脏中达1μg/kg;TNZ、DMZ和ONZ在肌肉、脂肪、肝脏和肾脏中均为1μg/kg。空白样品添加药物浓度为0.5～4μg/kg时,6种药物的回收率为60%～83%,日间变异系数均小于15%。 GC-MS/MS法样品中硝基咪唑类药物用二氯甲烷提取,盐酸反萃取。盐酸溶液用K2HPO4碱化,再用二氯甲烷反萃取,萃取液于40℃水浴中旋转真空蒸干。残余物用乙酸乙酯3mL溶解,于40℃水浴氮气吹干,加入BSA和异辛烷各50μL,50℃衍生60min,进样分析。色谱柱为VF-5 GC-MS柱,质谱检测器。DMZ、RNZ、SNZ、MNZ和ONZ的二级母离子m/z分别为141、214、181、182和276。DMZ的特征离子m/z为95、111、112、141和142;RNZ为153、167、168和215:SNZ为112、140和182;MNZ为112,140、167和182;ONZ为215、230和276等,DMZ的定量离子m/z为95和142;RNZ为167、168和214;SNZ为112和140;MNZ为140和167:ONZ为215、230和276。结果表明,5种药物标准液浓度在0.005～1.6μg/mL时,与响应值呈良好线性关系,相关系数均大于0.998。RNZ的检测限可达0.2μg/kg,SNZ为0.5μg/kg,DMZ、MNZ和ONZ为1μg/kg。空白组织样品中添加药物浓度在0.2～4μg/kg时,5种药物的回收率在69%～82%,日间变异系