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派琴虫(Perkinsus spp.)是海产贝类中的重要原生动物寄生虫,广泛分布于世界各地。其中部分种类(P.marinus和P.olseni)能引起贝类派琴虫病,导致贝类大量死亡,造成经济损失。鉴于派琴虫对贝类的严重危害性,有必要对中国沿海分布的贝类寄生派琴虫进行物种多样性和宿主多样性研究,以便为派琴虫病害的科学预防和监测提供理论依据。本研究通过调查中国黄渤海、东海和南海常见贝类体内派琴虫的寄生状况,确定派琴虫的感染种类及地理分布;通过对广西沿海贝类进行季度监测,掌握派琴虫的寄生宿主多样性和流行规律;同时建立一种快速灵敏的实用检测技术。主要研究结果如下:1、中国沿海三大海域中选取9个采样地点,利用PCR方法检测8种贝类:太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)、香港牡蛎(C.hongkongensis)、缢蛏(Sinonovacula constrzcta)、菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)、毛蚶(Scapharca subcrenata)、皱肋文蛤(Meretrix lyrata)、皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)、杂色鲍(H.diversicolor)共1399个样品的派琴虫感染情况。结果表明,共发现3种派琴虫,分别为P.olseni、P.beihaiensis、P.chesapeaki。这些派琴虫均可以感染多种贝类宿主,其中,P.olseni更易寄生菲律宾蛤仔,P.beihaiensis更易寄生于牡蛎。从地理位置上看,P.olseni分布广泛,在各个采样地点均有较高的感染率,但主要分布在黄渤海和东海海域;P.beihaiensis则在南海海域分布较多,为主要的派琴虫感染种类。此外,在中国首次发现P.chesapeaki感染毛蚶、缢蛏、皱肋文蛤等贝类宿主。2、调查广西沿海常见贝类的派琴虫感染情况。结果表明,在调查的14种贝类中,13种不同程度的感染了P.olseni,8种不同程度的感染了P.beihaiensis,7种同时感染了这两种派琴虫。其中,P.olseni在尖紫蛤(Soletellina acuta)、棕带仙女蛤(Callista erycina)、菲律宾蛤仔、毛蚶等4种贝类中的感染率显著高于其余10种,而P.beihaiensis在香港牡蛎和翡翠贻贝(Perna viridis)中的感染率显著高于其它12种。此外,香港牡蛎寄生P.beihaiensis在冬季的感染率显著高于其它季节,寄生P.olseni的感染率比P.beihaiensis低得多,而且各个季节之间感染率变化不明显。菲律宾蛤仔寄生P.olseni的感染率则显著高于P.beihaiensis,但在春季和夏季未发现两种派琴虫感染。3、建立了重组酶聚合酶扩增(Recombinase polymerase amplification,RPA)结合侧向流动试纸条(Lateral flow strips,LF)方法用于检测牡蛎样品中的P.beihaiensis,整个实验在37℃约耗时30 min即可完成;灵敏度与荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)相同,最低检测到26拷贝的DNA且结果可以通过试纸条直接读出;虽然能检测出另外两种派琴虫,但与其它微生物病原没有交叉感染。在对60个牡蛎样品进行临床检测时,LFRPA相比于普通PCR表现出86.2%的灵敏性和77.4%的特异性,两种方法的总体一致性为81.7%。LF-RPA相比于qPCR表现出93.3%的灵敏性和86.7%的特异性,两种方法的总体一致性为90.0%。LF-RPA方法不需要升降温系统、产物纯化、琼脂糖凝胶及电泳观察,在条件简陋或是缺少设备的野外环境中亦可进行派琴虫的检测。