【摘 要】
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环腺苷酸(cAMP)是调控哺乳动物卵母细胞减数分裂恢复与否的关键因子,如何通过调节卵母细胞内cAMP水平来改善卵母细胞的成熟质量尤为重要。为了明确绵羊卵母细胞体外成熟体系
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环腺苷酸(cAMP)是调控哺乳动物卵母细胞减数分裂恢复与否的关键因子,如何通过调节卵母细胞内cAMP水平来改善卵母细胞的成熟质量尤为重要。为了明确绵羊卵母细胞体外成熟体系中的适宜添加因子,通过调节卵母细胞内cAMP水平,继而改善卵母细胞体外成熟质量,本研究首先在常规体外成熟体系中添加磷酸二酯酶3抑制剂西洛酰胺(Cilostamide)或其激动剂乌药醚内酯(Linderane),探讨了其对绵羊卵母与卵丘细胞内cAMP水平调控的时间效应与卵母细胞核成熟的影响;随后在双相体外成熟系统中添加Cilostamide或雌二醇(E2),分别探讨了两者单独或联合添加对卵母和卵丘细胞内cAMP水平与卵母细胞核成熟的影响。结果显示:在常规体外成熟体系中培养2h内,Cilostamide能提高卵母、卵丘细胞cAMP水平(p<0.05),培养4h可以阻滞卵母细胞减数分裂恢复(p<0.05);培养1h时,Linderane能特异性降低卵母细胞cAMP水平(p<0.05),培养4h能促进卵母细胞减数分裂恢复(p<0.05)。在双相体外成熟系统中,利用Cilostamide或/和E2预处理COCs可以维持卵母细胞内高水平cAMP,且Cilostamide与E2联合添加没有累加效应;添加Cilostamide可以阻滞卵母细胞减数分裂(p<0.05),改善核成熟状态。综上,本研究首次揭示Linderane具有下调绵羊卵母细胞内cAMP水平、促进卵母细胞减数分裂恢复的作用;在双相体外成熟系统中添加Cilostamide或E2可以提高卵母细胞内cAMP水平,改善核成熟状态,对于改善绵羊卵母细胞体外核质成熟不同步有积极意义。
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