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目的:研究树突状细胞(DC)联合同源细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对急性髓细胞白血病细胞株KG-1a中白血病干细胞的杀伤及诱导凋亡作用,从而为细胞免疫治疗清除残存白血病提供理论基础和实验依据。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC),静置培养3小时后,贴壁细胞用重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介素4(rh IL-4)诱导培养DC,悬浮细胞用重组人白介素2(rh IL-2)、重组人白介素1(rh IL-1)、重组人干扰素r(rh IFN-r)和重组人CD3单克隆抗体(rh CD3mAb)诱导培养CIK。将KG-1a细胞冻融物作为抗原负载DC,与同源CIK共培养作为实验组(pulsed-DC-CIK),无抗原负载的DC与CIK共培养作为对照组(DC-CIK),以CIK单独培养作为空白对照组。光镜下观察细胞形态学变化及增殖情况,流式细胞仪鉴定DC及CIK细胞免疫表型,流式细胞术检测各组对白血病干细胞(CD34+CD38-CD123+)的杀伤效应的前后比较,及DC-CIK对CD34+CD38-CD123+亚群诱导凋亡的比较。结果:体外培养的DC具有典型的形态学表现及表型特点;培养12天时,pulsed-DC-CIK组、DC-CIK组及CIK组中CD3+CD56+比例依次升高,差异有统计学意义(P<0.05);对白血病干细胞的杀伤效应(CD34+CD38-CD123+亚群比例),pulsed-DC-CIK组与DC-CIK组杀伤效应最强,两组差异无统计学意义(P>0.05),与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);DC-CIK对KG-1a细胞有诱导凋亡作用,凋亡率由(2.34±0.74)%升至(12.27±1.01)%,差异有统计学意义(P<0.05),但对其中CD34+CD38-CD123+细胞亚群无明显的诱导凋亡作用。结论:DC联合CIK对急性髓细胞白血病干细胞有明显的杀伤作用,能诱导急性髓细胞白血病细胞株KG-1a细胞凋亡,但对白血病干细胞的诱导凋亡作用不明显,DC-CIK可作为清除残存白血病的重要方法,使治愈白血病成为可能,以此为细胞免疫治疗清除残存白血病提供理论基础和实验依据。