毒死蜱对非靶标昆虫异色瓢虫的致死及亚致死效应研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuyouan321
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世界人口正在稳步增长,联合国最近的人口预测表明:到2050年世界人口将增至91亿。在世界人口如此增长的趋势下,农作物产量需要不断提高才能满足世界对粮食的需求。为了保护农田作物免受害虫的侵害,杀虫剂的开发和使用也必将增加。生物防治生物或者害虫的天敌常与目标害虫一起存在于同一田间区域中,故而同时暴露于一些广泛使用的杀虫剂中。目前有许多研究都集中在杀虫剂对天敌的负面影响上。毒死蜱是一种著名的农药,广泛用于防治双翅目、鳞翅目、鞘翅目和半翅目害虫。异色瓢虫(Coleoptera,Coccinellidae)是众所周知的一种害虫天敌。在欧洲、日本、中国、非洲和美国在内的世界许多地区,这种害虫天敌是不同的IPM策略中非常重要的一部分。本研究的主要目的是评估毒死蜱对异色瓢虫的不良影响,即通过对异色瓢虫发育期、成活率、寿命、取食潜力、繁殖、产卵期、转录组文库变化等不同生物学参数的变化的分析,评估毒死蜱对异色瓢虫的短期或长期毒性。结果如下:1.急性毒性测定本研究采用微量施药器对24 h龄(3龄)幼虫进行1毫升农药溶液的处理,测定毒死蜱的致死浓度和亚致死浓度。农药处理3天后,记录急性毒性数据。毒死蜱的短期毒性评价结果显示:毒死蜱对三龄幼虫的LC50为15.90 mg L-1,LC10和LC30 4.62mg L-1,9.59 mg L-1。急性毒性试验结果表明,LC10浓度可使3龄幼虫的发育历期缩短,但LC30处理后其发育历期延长;LC10和LC30均显著延长4龄幼虫和蛹的发育历期。2.毒死蜱对异色瓢虫的长期毒性效应对三日龄幼虫施用亚致死浓度(LC10和LC30)毒死蜱,采用年龄段生命表评价亚致死效应,用于估计毒死蜱对异色瓢虫的长期影响。每24小时记录每只个体施药后的发育期、繁殖力、存活率、寿命,直至最后一只个体死亡。结果表明,产卵前期(TPOP+POP)和平均世代时间(T)均显著增加。与此同时,LC10和LC30对雌性生殖力、雌雄寿命、种群内在增长率(r)、有限增长率(λ)和净繁殖率(R0)增长参数产生负向影响。这些结果阐述了毒死蜱对异色瓢虫年龄段生命表重要参数产生的不良影响,即可能导致种群增长和生物防控天敌的捕食率下降。3.杀虫剂胁迫下基因表达变化通过全基因组转录组测序,评估毒死蜱引起异色瓢虫基因表达的变化。这项技术提供了有关农药作用机制的信息。毒死蜱LC30(9.59 mg(a.i)L-1)为实验组,丙酮作为对照。研究毒死蜱处理引起的不同DEGs(差异表达基因)。两组分别拼接了61038530和6541908条clean reads的文库。并将其组装成143648724个转录本。所有这些转录本被分成38722个unigenes。其中与非冗余(Nr)NCBI蛋白数据库匹配的有19507个,与Swiss Prot数据库匹配的有14089个。在这些unigenes中,有54个基因有明显不同的表达差异,其中21个是下调的,33个是上调的。选择8个基因(2个下调,6个上调)进行q RT-PCR验证。实验表明,毒死蜱改变了异色瓢虫的转录组结构和其信号通路中不同基因的表达。
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