碳纳米管(Carbon Nanotubes，CNTs)是近年来常见的一种药物载体，由于其独特的尺寸和结构，使得其在生物学方面具有很好的应用前景，其不仅能够被动穿过多种细胞膜，被肿瘤细胞摄取，而且还能吸收808nm的近红外光(Near Infrared，MR)选择性地引起肿瘤细胞死亡，同时不伤害正常细胞，从而达到化疗与热疗的协同作用。但是，由于碳纳米管本身存在分散性差、易聚集等缺点，限制了其在生物医学领域中的应用，因此，选择合适的材料提高其分散性具有重要的研究意义。　　壳聚糖(Chitosan，CS)是一种天然的阳离子多糖，具有良好的水溶性、生物相容性及生物可降解性，可以通过非共价吸附的方式与碳纳米管结合，提高碳纳米管分散性。　　细胞穿膜肽TAT多肽(TAT peptides，TATp)，是目前研究较多的一种细胞穿膜肽，其主要是由碱性氨基酸精氨酸和赖氨酸组成，带大量正电荷，具有良好的水溶性，能够穿透细胞膜进入细胞质或细胞核中。　　本论文采用TAT多肽通过共价交联的方法对低分子量的壳聚糖(MW=5000～8000，脱乙酰度＞90％)进行修饰，形成TAT-CS（以下简称TC），并采用TC对羧基化的多壁碳纳米管(MWCNT-COOH)进行修饰，以期增强其分散性和细胞穿膜性。研究将化疗药物DOX通过非共价吸附的方式结合于碳纳米管上，然后采用TC对其进行修饰，制备MWCNT/DOX/TC载药系统，利用碳纳米管本身对近红外光具有选择性吸收的特性，将化疗与热疗联合起来，探讨其对肝癌的治疗效果。具体内容主要从以下几个方面展开：　　1.MWCNT/DOX/TC复合物的制备及表征　　将不同比例的DOX/MWCNT混合，TC通过非共价吸附的方式结合于MWCNT/DOX复合物表面，通过透析法计算不同投料比条件下的包封率和载药量;并探讨其在体外不同条件下的释放行为。　　结果表明：投料比为DOX/MWCNT=3/1时，载药量达到最大;且其体外释放行为具有pH响应性。Zeta电位值的测量结果表明，DOX及TC的修饰均能增大MWCNT-COOH的电位值;采用透射电镜观察了MWCNT、MWCNT/DOX和MWCNT/DOX/TC的表面形态，结果显示，三者的表面形态基本一致;拉曼光谱分析结果显示，三者的I(D)/I(G)(1315/1599cm-1)比值也没有明显差异，上述结果提示，负载DOX或TC对MWCNT的结构没有产生明显影响。UV-可见光扫谱及FTIR分析结果均能证明DOX能有效地吸附于碳纳米管上。　　2.MWCNT/DOX/TC作为药物递送载体及体内影像跟踪评价　　采用激光共聚焦显微镜观察了载药系统在肝癌细胞BEL-7402内的分布，结果显示，MWCNT/DOX/TC可以被肝癌细胞有效摄入，并可在胞浆中将DOX释放出来并进入胞核从而发挥其生物学功能。　　为了观察药物递送系统对细胞的毒性，将BEL-7402与DOX、MWCNT/DOX、MWCNT/TC或MWCNT/DOX/TC分别培养后观察细胞活力，结果显示：MWCNT/TC本身对肝癌细胞的活力只有轻微抑制;MWCNT/DOX/TC及MWCNT/DOX、DOX处理组对细胞活力的抑制作用有一定增强作用。通过皮下接种表达荧光素酶的肝癌细胞BEL-7402构建裸鼠肝癌动物模型，观察注射不同剂量的MWCNT/DOX/TC对肿瘤的抑制效果，体内影像实时跟踪药物释放。　　结果显示，该药物递送载体可以有效地增强DOX在瘤内的驻留时间，起到缓释效果。　　3.MWCNT/DOX/TC药物递送系统在化疗-热疗联合应用中的效果研究　　为了观察NIR照射是否会刺激DOX从药物载体上的释放，我们研究了DOX在不同pH值以及有无NIR条件下的释放情况，结果显示，NIR的存在并未对DOX的释放有明显的影响;体外细胞实验中，CCK-8检测细胞毒性的结果显示，MWCNT/TC存在的情况下，NIR照射组的细胞活力明显低于无NIR照射的组别，说明药物载体MWCNT/TC存在的条件下NIR的照射能抑制细胞的生长;　　为了观察化疗与热疗联合条件下对肿瘤生长的抑制效果，利用DOX固有的红色荧光，我们采用活体动物成像技术观察了DOX在肿瘤内的驻留情况。　　结果显示：MWCNT/DOX/TC能够明显延长DOX在肿瘤组织中的驻留时间，NIR的照射对载药系统中DOX的释放没有明显影响。　　利用在体生物发光成像技术，采用小动物活体成像仪实时跟踪观察了纳米载药系统的抗肿瘤效果，观察时间为25天。　　结果显示，MWCNT/DOX/TC与NIR照射联用的抗肿瘤效果最为显著。　　综上可知，MWCNT-COOH能有效地吸附化疗药物DOX，TAT-CS修饰后可以显著提高其分散性和细胞穿膜效应，降低碳纳米管的毒性。体外细胞实验证实此药物载体对细胞无明显的毒副作用，且此载体可以有效地控制DOX在细胞内的缓慢持续释放;体内实验证明此药物载体可以有效地延长药物在瘤内的驻留时间;同时也证明在NIR的照射下，其抑瘤效果能显著提高，这些研究证明MWCNT/DOX/TC药物递送系统对肿瘤联合治疗具有重要意义。