远志苗多酚抗血小板聚集及抗血栓作用研究

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血栓性疾病是一类严重危害人类生命健康的疾病,可累及全身各个器官及系统,其发病率、致死率和死亡率都很高。研究表明,血栓的发病机制主要与血管因素、血栓形成、血液理化性质改变及血流的改变有关。目前血栓性疾病的临床治疗主要以阿司匹林和氯吡格雷为主,但是长时间服用会出现药物抵抗、严重出血、非特异性选择等副作用。远志苗来源于远志科植物远志Polygala tenuifolia Willd.或卵叶远志Polygala sibirica L.的干燥地上部分,具有抗氧化、抗炎等活性。远志苗中的多酚类成分芒果苷,具有抗血小板聚集的作用。此外,其同属植物瓜子金具有活血化瘀的作用,在华北地区与远志全草混用,故推测远志苗可能具有抗血小板聚集活性。故本研究以远志科植物远志Polygala tenuifolia Willd.的地上部分为材料,用HPLC和UHPLC-TSQ-MS分别对远志苗药材、远志苗粗提物、远志苗多酚进行含量测定及鉴定,通过体外抗血小板聚集实验及体内血栓模型测定远志苗抗血小板聚集及抗血栓形成作用,并对其作用机制进行初步研究。主要内容和结果包括:1、以ADP为诱导剂,对远志苗粗提物、远志苗多酚、芒果苷和3,6’-二芥子酰基蔗糖进行体外血小板聚集抑制活性测定,发现远志苗多酚对ADP为诱导剂的对抗作用优于远志苗粗提物、芒果苷和3,6’-二芥子酰基蔗糖;对比远志苗多酚对二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)、胶原(COLL)和肾上腺素(EPI)诱导剂的血小板聚集抑制作用,发现远志苗多酚对ADP为诱导剂的对抗作用优于AA、COLL和EPI,提示远志苗多酚通过ADP和AA途径抑制血小板聚集,ADP为主要途径。2、通过小鼠尾静脉出(凝)血时间、胶原蛋白—肾上腺素诱导的小鼠急性肺血栓和大鼠颈总动脉血栓三种模型,测定远志苗多酚对小鼠出(凝)血时间、小鼠偏瘫数死亡数和大鼠血栓长度、质量的影响,对远志苗多酚抗血栓活性进行评估。结果表明远志苗多酚能延长小鼠尾静脉出血时间,明显降低急性肺血栓小鼠死亡率;减少大鼠颈总动脉血栓湿重和血栓长度,显著提高6-keto-PGF1a和t-PA的产生,降低TXB2和PAI-1水平,提示远志苗多酚抑制血栓形成与提高6-keto-PGF1a和t-PA的产生,降低TXB2和PAI-1水平有关。。3、以皮下注射大剂量盐酸肾上腺素加冰水浴造成大鼠急性血瘀模型,口服灌胃给予药物7 d,于末次给药0.5 h后颈总动脉取血,分别测定全血黏度、血浆黏度、红细胞数等血液流变学指标和血常规。结果显示,远志苗多酚对血液流变异常有改善作用,同时对急性血瘀大鼠心肌细胞加宽、肺间质水肿现象有一定改善。可能与远志苗多酚能够显著降低血液中TXB2和ET-1含量以及升高血液中6-keto-PGF1a和e NOS的含量有关。
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