基于阿洛酮糖与11种有机酸的蜂蜜真实性鉴别方法研究与应用

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中国作为养蜂大国,其蜂蜜的产量和出口均居世界前列。蜂蜜因其富含多种营养成分而受到广大消费者的喜爱。由于蜂蜜市场供不应求,出现大量掺假蜂蜜以次充好,导致蜂产品质量安全问题日益突出,并严重影响蜂产品行业的健康发展。蜂蜜外源掺假鉴别标记物和内源性成分的研究为蜂蜜真实性评价提供一定的理论和技术参考。为明确阿洛酮糖是一种新型的蜂蜜掺假鉴别标记物,并探索蜂蜜中内源成分有机酸含量特征,本研究以糖浆和蜂蜜为试验材料,采用液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)获得阿洛酮糖的含量信息;采用离子色谱-电导/电化学检测(IC-CD/ECD)和超高压液相色谱-紫外检测(UPLC-UV)测定中国六大单花蜜种(油菜蜜、荆条蜜、椴树蜜、洋槐蜜、枣花蜜和荔枝蜜)的1 1种有机酸,结合主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)模型进行数据分析,掌握蜂蜜有机酸含量特征。主要研究结果如下:(1)为探究蜂蜜新型掺假鉴别标记物阿洛酮糖,本研究以58批不同类型的糖浆和454批不同植物源蜂蜜样品(24种单花蜜和1种百花蜜)为试验材料,建立HPLC-ELSD测定阿洛酮糖的方法,并对糖浆和蜂蜜样品中阿洛酮糖含量进行分析。结果表明,58批糖浆样品中阿洛酮糖的检出率为69.0%,平均含量为0.31 g/100g,说明糖浆中普遍存在阿洛酮糖。除部分枣花蜜外,其他蜂蜜样品中均未检测到阿洛酮糖。53批枣花蜜中有23批检测到阿洛酮糖,平均含量为0.21 g/100g。本研究是首次对中国不同类型糖浆和蜂蜜样品的阿洛酮糖进行的全面研究,说明阿洛酮糖可作为蜂蜜掺假检测的新标记物,但该目标不适用于枣花蜜。(2)为探究蜂蜜内源性成分有机酸含量表征,本研究以中国六种植物源蜂蜜为试验材料,建立IC-CD、IC-ECD、UPLC-UV三种检测有机酸的方法,对蜂蜜中1 1种有机酸进行测定,包括葡萄糖酸、乙酸、甲酸、苹果酸、柠檬酸、丙酸、丁酸、丙酮酸、D-半乳糖醛酸、琥珀酸和富马酸。结果表明:葡萄糖酸作为蜂蜜的主要有机酸占所测有机酸的88.6%,平均含量为4319.3 mg/kg;乙酸、甲酸、苹果酸和柠檬酸占所测有机酸的11.1%,平均含量分别为47.1 mg/kg、118.8 mg/kg、345.0 mg/kg和28.2 mg/kg;丙酸在所有样品中都未检出;丁酸、丙酮酸、D-半乳糖醛酸、琥珀酸和富马酸只在部分样品中检出。(3)利用PCA和PLS-DA模型对中国六大植物源蜂蜜有机酸数据进行统计分析。其中,PCA结果表明,前两个主成分解释了总方差的40.4%,93.2%的样品点均在95%置信区间内。通过PLS-DA分析,中国六种不同植物源单花蜜种被81.4%准确分类,与PCA分析的结果一致。
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