调节性T细胞、Th17细胞与免疫性血小板减少性紫癜的相关研究

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目的:本实验通过流式细胞术检测免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者接受糖皮质激素(GC)、静脉用丙种球蛋白(IVIG)治疗前后,脾切除后以及正常人外周血单个核细胞(PBMC)调节性T细胞(Treg,以CD4+CD25+Foxp3+为标志)、Th17细胞(以IL-17A+为标志)的比例,研究ITP患者与正常人PBMC中Treg、Th17细胞比例的差异,以及三种治疗方法对ITP患者PBMC中Treg、Th17细胞的影响,治疗前后ITP患者血小板计数与Treg、Th17细胞的相关性。材料和方法:31例ITP患者为中南大学湘雅二医院2011年9月至2012年2月的住院及门诊病人,按不同治疗方法分为三组:GC、IVIG、脾切除组。27例未行脾切除患者治疗前血小板计数在2-30×109/L之间;4例己行脾切除患者血小板计数在25~142×109/L之间;正常对照组来自门诊体检的健康志愿者,血小板计数在157-306×109/L之间。流式细胞技术检测各标本PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+和Th17(IL-17A+)/CD3+CD4+的比例。结果:(1)ITP患者治疗前与正常对照相比,CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+细胞的比例减低(2.26±0.75vs5.36±1.58),P<0.05,差异有统计学意义;GC、IVIG两组治疗后与治疗前相比,CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+细胞的比例增加(4.38±1.46vs2.32±0.79,4.67±1.45vs2.01±0.50),P<0.05,差异有统计学意义;脾切除与ITP患者治疗前相比CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+细胞的比例增加(4.37±0.73vs2.26±0.75),p<0.05,差异有统计学意义;治疗后三组与正常对照组两两比较,CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+细胞的比例无统计学差异(P>0.05)。(2) ITP患者治疗前与正常对照相比,Th17(IL-17A+)/CD4+细胞的比例增高(2.58±0.55vs1.17±0.50),P<0.05,差异有统计学意义;GC、IVIG、两组治疗后与治疗前相比,CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+细胞的比例减低(1.30±0.49vs2.01±0.55,1.43±0.57vs2.66±0.65), P<0.05,差异有统计学意义;脾切除与ITP患者治疗前相比,CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+细胞的比例减低(1.37±0.27vs2.58±0.55), P<0.05,差异有统计学意义;治疗后三组与正常对照组两两比较,CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+细胞的比例无统计学差异(P>0.05);(3) ITP治疗前后血小板计数(×109/L)的差值与Treg/CD4+(%)差值呈正相关关系,P<0.05,有统计学意义。结论:(1)ITP患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+细胞的比例降低,Th17(IL-17A+)/CD3+CD4+细胞的比例增加,提示Treg细胞比例减少和Thl7细胞比例增加参与了ITP的发病。(2)GC、IVIG、脾切除三种治疗都可以提高CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+细胞的比例,降低Th17(IL-17A+)/CD3+CD4+细胞的比例,提示上调患者外周血Treg细胞,下调Th17细胞表达可能是这三种方法治疗ITP的共同机制之一。(3)ITP治疗前后血小板计数(×109/L)的差值与Treg/CD4+(%)差值呈正相关关系。
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