附子为中药常用植物药之一,具有多种药效。前期研究发现附子粗提物对抑郁症具有治疗作用,但其发挥抗抑郁作用的有效成分尚未明确。附子含有生物碱和多糖两大主要成分。其中附子生物碱是一种可以振奋精神、提高信心的天然化学成分。而附子多糖已被证明急性给药后能够缩短小鼠的强制游泳不动时间,对抑郁样行为具有改善作用。因此认为附子生物碱和多糖均有可能具有抗抑郁作用,但是这种结论尚缺乏足够的理论依据。本论文将从行为药理学、分子生物学、生物信息学多方面考察并探讨附子生物碱和多糖的抗抑郁作用及其机制。本研究中附子生物碱和多糖的提取分离是在传统方法的基础上优化后进行的。附子生物碱主要通过超声提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析等系列方法提取分离得到,再经高效液相-质谱联用等方法对其成分进行分析鉴定。附子多糖则是通过水提、醇沉、Sevage脱蛋白等系列方法提取分离得到。为充分探讨附子生物碱及多糖的抗抑郁作用机制,我们分别建立了卵巢摘除抑郁动物模型和固定应激抑郁动物模型。附子生物碱和多糖均采用灌胃方式给药。首先通过强制游泳实验和旷场实验研究了附子生物碱的抗抑郁作用及其剂量效应关系。结果表明,附子生物碱连续给药7天能够缩短正常小鼠和卵巢摘除模型小鼠的强制游泳不动时间,而不影响小鼠本身的自发运动量。其中对于正常小鼠,尤以剂量10mg/kg/day效果最为明显;而对于卵巢摘除小鼠,尤以剂量30mg/kg/day效果最为明显。免疫印迹及酶联免疫吸附测定结果显示,一定剂量的附子生物碱连续给药后,卵巢摘除小鼠前额叶灰质和海马内BDNF的蛋白表达水平及CREB磷酸化水平升高。这提示CREB-BDNF信号通路可能介导了附子生物碱对卵巢摘除小鼠的抗抑郁作用。RNA-seq结果进一步显示,附子生物碱对卵巢摘除小鼠抑郁样行为的改善作用伴随着小鼠前额叶灰质和海马内的基因表达差异,这些差异表达基因主要集中在神经活性受体和配体相互作用、细胞因子和细胞因子受体相互作用以及卵巢类固醇激素合成相关的信号通路上。同时,附子多糖抗抑郁作用研究的行为学实验结果显示,附子多糖100mg/kg/day连续给药14天能够缩短正常小鼠的强制游泳不动时间而不影响小鼠本身的自发运动量,且该剂量的附子多糖连续给药21天亦能够缩短应激模型小鼠的强制游泳不动时间而不影响小鼠的自发运动量。免疫印迹及酶联免疫吸附测定结果表明,附子多糖100mg/kg/day连续给药14天能够提高正常小鼠前额叶灰质和海马内BDNF的蛋白表达水平。此结果提示,BDNF蛋白表达量的增加可能参与了附子多糖的抗抑郁作用。上述研究结果初步确认了附子生物碱和多糖的抗抑郁活性并在一定程度上阐明了二者发挥抗抑郁作用的机制,为指导临床合理用药提供了实验依据。但附子生物碱和多糖中发挥抗抑郁作用的具体活性成分、二者抗抑郁作用机制的异同、参与调控抗抑郁作用的基因及其生物学功能等均有待进一步深入研究。