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目的:探索骨髓基质细胞HS-5对急性髓系白血病细胞HL-60凋亡的影响及其可能机制,为急性髓系白血病的治疗提供理论依据。方法:(1)应用骨髓基质细胞HS-5与急性髓系白血病细胞HL-60建立体外共培养模型从而模拟体内骨髓微环境对白血病细胞凋亡的影响。应用CCK8试剂盒检测不同实验组间HL-60细胞增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测各组HL-60细胞凋亡率;PI单染流式细胞仪检测各组HL-60细胞周期时相分布;应用扫描电镜观察共培养条件下HS-5骨髓基质细胞与HL-60急性髓系白血病细胞的位相特征;半定量RT-PCR等方法检测各实验组HL-60细胞Hedgehog信号通路组成成分GLI 1基因及凋亡基因BCL-2、BCL-XL表达情况;免疫荧光法检测HL-60细胞GLI 1蛋白表达状况。结果:(1)与HS-5细胞共培养的HL-60细胞增殖速度快,用以GLI为靶点的Hedgehog信号通路抑制剂GANT61处理共培养体系后HL-60细胞增殖速度减慢。(2)与HS-5细胞共培养的HL-60细胞凋亡率减少,用以GLI为靶点的Hedgehog信号通路抑制剂GANT61处理共培养体系后HL-60细胞凋亡率增加。(3)在共培养48h时,HL-60细胞阻滞于G0/G1期,G0/G1期的细胞比例明显增多,此种情况持续到共培养72h。(4)骨髓基质细胞HS-5与急性髓系白血病细胞HL-60共培养时,HL-60细胞与骨髓基质细胞HS-5粘附生长,共培养条件下,扫描电镜观察见到部分HL-60细胞生长入骨髓基质细胞层。(5)RT-PCR凝胶电泳结果显示,共培养体系中HL-60细胞GLI 1 m RNA表达上调,抑凋亡基因BCL-2和BCL-XL的m RNA表达上调。(6)免疫荧光法检测GLI 1蛋白表达状况:共培养体系中HL-60细胞GLI 1蛋白表达上调。结论:(1)骨髓基质细胞对急性髓系白血病细胞具有促进增殖作用。(2)骨髓基质细胞对急性髓系白血病细胞具有抑制凋亡作用。(3)骨髓基质细胞激活急性髓系白血病细胞中的Hedgehog信号通路进而上调下游靶基因BCL-2和BCL-XL。