目的:探讨Compound 42的化学稳定性。阐明香豆素衍生物Compound 42作用于细胞外分泌型蛋白质组织激肽释放酶7（KLK7）后,阻断PANC-1细胞内与增殖相关的信号通路继而发挥抗胰腺癌细胞增殖的具体分子机制。本实验的成功实施将为阐明KLK7介导恶性肿瘤细胞发生发展奠定良好的基础。方法:（1）采用TCGA及GTEx数据库,结合Sangerbox生物信息学分析工具分析KLK7在胰腺癌中的转录水平;并利用TCGA Pancreatic Cancer（PAAD）数据库结合UCSC Xena生物信息学分析工具研究KLK7转录水平与胰腺癌患者生存期的相关性。（2）运用紫外分光光度计技术检测KLK7小分子抑制剂Compound 42随时间增加的降解情况。（3）实时无标记细胞分析仪（RTCA）技术持续检测Compound 42在50h内对胰腺癌细胞系PANC-1增殖的抑制作用。（4）使用不同浓度的Compound 42处理PANC-1细胞48h后,利用流式细胞仪检测其对细胞周期以及细胞凋亡的影响。（5）运用TMT定量蛋白质组学和转录组学技术研究Compound 42在细胞外对细胞膜上蛋白含量或者细胞内与增殖相关信号通路上的蛋白含量的影响,探讨Compound 42在细胞外调控细胞内增殖相关信号通路的具体分子机制。结果:（1）与正常胰腺组织相比,KLK7基因的转录水平在胰腺癌组织中显著升高,且与胰腺癌患者生存期呈负相关。（2）一定时间范围内,Compound 42在p H=7.4的生物环境下的最大吸收峰逐渐降低,降解速率随着时间的增加而变得极为减慢,因此Compound 42具有一定的稳定性。（3）RTCA结果表明随着时间的增加,Compound 42对PANC-1细胞增殖的抑制能力逐渐增强,且呈浓度依赖性。（4）随着浓度的增加,Compound 42能够将PANC-1细胞周期阻滞在G₀/G₁期,但是对细胞凋亡没有明显促进作用。（5）对蛋白质组学和转录组学所得到的结果进行生物信息学分析发现,Compound42处理PANC-1细胞48h后对细胞膜上的EGFR、IGF1R、FAK蛋白含量和m RNA水平发生显著变化,此外,细胞内与增殖密切相关的Cell cycle、p53、PI3K/AKT/m TOR、Ras/Raf/MEK/ERK、Wnt及Hippo信号通路中关键蛋白含量和转录水平发生变化。因此,我们推测Compound 42作用于KLK7后可能通过阻断上述信号通路从而达到抑制PANC-1细胞增殖的目的。结论:本实验在前期研究基础上,首先表明胰腺癌患者中KLK7转录水平升高且与患者生存期短密切相关。Compound 42具有一定的稳定性且能够呈浓度依赖性的抑制PANC-1细胞的增殖,使细胞形态发生明显变化,可将细胞周期阻滞在G₀/G₁期,但对细胞凋亡未见明显影响。Compound 42处理PANC-1细胞后,调控细胞增殖的Cell cycle、p53、PI3K/AKT/m TOR、Wnt、Ras/Raf/MEK/ERK及Hippo信号通路中关键蛋白含量及其对应的差异表达基因发生显著变化,这可能为KLK7调控PANC-1细胞或者KLK7介导的其他恶性肿瘤具体分子机制的研究提供明确指向。