非霍奇金淋巴瘤（NHL）是血液系统恶性肿瘤中较为常见的一种类型。NHL常多发于青壮年，绝大多数为B细胞起源。研究发现在90%以上的B细胞性NHL细胞表面均表达有CD20抗原分子。由于该抗原具有易于接近、与抗体结合后无内化、脱落及调变的特点，因此成为治疗B细胞淋巴瘤的理想目标靶点。在最早被美国食品药品管理局（FDA）批准上市用于NHL治疗的抗CD20人鼠嵌合抗体（利妥昔单抗，美罗华，MabThera○R，Rituximab-C2B8，以下简称原研药）的临床实践中发现，利妥昔单抗显示出较好的疗效和安全性。但在临床应用中也存在一定的问题，如部分患者对利妥昔单抗的治疗并不产生临床反应；部分患者单独使用该药时，临床治愈率非常低；部分经临床治疗有效的患者，停药后会很快出现病情复发或进展，或者再次使用时产生治疗抵抗现象，并且具有产生人抗鼠抗体（HAMA）反应的潜在风险。针对这一现象，抗体药物国家工程研究中心（NERCAM）积极探索，通过对细胞培养条件和生产工艺的优化改进，改变抗体的糖基化相对比例提高抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应(ADCC效应)，成功研发出与Rituximab相同的抗原结合表位的人鼠嵌合重组抗CD20抗体（以下简称CMAB304），并对其结构和功能进行了详尽的分析和验证。本课题以原研药利妥昔单抗为对照，应用液相色谱-电喷雾离子化四极杆飞行时间质谱(LC-ESI-Q-TOF)技术，通过交替高低能量碰撞扫描，源内诱导解离及二级质谱的方法从质量肽图水平到完整蛋白亚单位水平，再到游离寡糖水平逐级研究CMAB304的结构，特别是其寡聚糖结构特征，与原研药对比分析后对CMAB304糖链结构进行确证解析。研究发现，CMAB304与原研药具有相同的蛋白质一级结构，即氨基酸序列，同时在两种抗体的重链Fc段上又存在明显不同的糖形相对比例，即CMAB304在G0和G1特别是G0等非岩藻糖基化糖形方面比原研药含量明显升高。这一结果提示CMAB304应具有更高的体外ADCC活性。体外活性研究结果表明，CMAB304具有与FcγRIIIa（Fc gamma receptor IIIa，CD16a）更强的结合活力和更强的ADCC效应，但补体依赖的细胞毒效应（CDC）在两者之间并没有显示出明显的区别。这一发现进一步证实CMAB304具有与原研药不同的糖形相对比例水平。采用流式竞争法检测I期临床研究中受试者的血液样本，获取其血清药物浓度，使用WinNonLin（Pharsight Corp，6.1版）药动学分析应用软件进行房室模型拟合，探索其药动学和体内代谢规律。结果发现，两种抗CD20人鼠嵌合单克隆抗体具有基本相似的体内药物动力学过程，达到预期的试验目的。也就是说，两者重链Fc段糖形相对比例上的差异，并没有造成药物动力学规律上的明显区别。采用不良反应常用术语标准3.0版（CTCAE-v3.0）标准和WHO对淋巴瘤的疗效评价标准，分别评价CMAB304的耐受性及临床疗效。安全性方面的结果显示，CMAB304并不会带来新的严重的不良事件，不良事件发生率在可以接受的范围内。整个治疗期间，没有检测到抗CMAB304抗体的产生；在疗效方面，发现CD20抗原水平在给药后出现迅速、明显的降低；CD19＋和CD20＋细胞的清除呈剂量依赖性关系。本课题将在I期和IIa期临床研究中获得的疗效数据与原研药在相同的试验设计条件下取得的结果进行历史对照，结果显示，CMAB304表现出较原研药更高的治疗效应和更好的安全性。课题结果证实，低岩藻糖糖形水平的CMAB304，可以产生明显增强的体外ADCC效应，能带来临床治疗中更好的抗瘤治疗效果，提示CMAB304有望成为治疗NHL的新的备选药物。