动物体内的葡萄糖主要通过葡萄糖转运蛋白家族(Gluts)来运输,其中葡萄糖转运蛋白2(Glut2)主要存在于肝和胰腺组织中。当动物体内的葡萄糖含量低时,Glut2表现出很低的亲和力,而葡萄糖浓度升高时Glut2对葡萄糖的亲和力提高倾向。因此,动物胰腺中的Glut2与葡萄糖激酶共同发挥作用,感应葡萄糖的浓度变化的形式维持动物体内葡萄糖浓度的稳定。2010年Atwater根据Glut2的特性开发了一种基于选择性渗透休克(SOS)的分离胰岛的方法,该方法能够避免传统胶原酶所带来的负面影响,在临床应用上有着十分巨大的潜力。其原理是利用胰岛中Glut2转运葡萄糖的特殊性,在高糖环境中使胰岛保持稳定的内外渗透压,而不含Glut2的外分泌腺因细胞内渗透压过高导致细胞涨破,从而达到胰岛分离的效果。研究表明,新生猪不适合用SOS法分离胰岛,而青年猪和成年猪适合于SOS法分离胰岛,但其原因不明。因此,本研究采用免疫组织化学、WB、RT-PCR等技术,研究不同发育阶段猪胰腺组织Glut2的分布特点及变化规律,进一步完善和建立新的动物胰岛分离方法奠定基础。结果如下:1.免疫组织化学试验结果表明,初生猪胰腺中未见完整胰岛,青年猪、成年猪、胰岛发育良好,胰岛轮廓清晰,呈椭圆形或圆形;初生猪可见散在Glut2阳性信号表达,青年猪、成年猪可见Glut2免疫阳性信号定位于胰岛细胞膜,呈棕黄色。2.Western blotting结果表明,与对照组相比,初生猪Glut2相对表达量为0.26860±0.1216,青年猪Glut2相对表达量为1.2718±0.1211,是初生猪的4.75倍,成年猪Glut2相对表达量为0.8288 7±0.1 029,是初生猪的3.08倍,青年猪和成年猪Glut2表达量均极显著高于初生猪,且青年猪表达量显著高于成年猪。3.Real-time PCR结果表明,初生猪Glut2 mRNA相对表达量为1.000±0.04,青年猪相对表达量为0.02919±0.01792,是初生猪的0.03倍,成年猪相对表达量为0.07274,是初生猪的0.07倍,是青年猪的2.5倍,青年猪和成年猪Glut2 mRNA相对表达量均显著低于初生猪,且二者未见显著差异。4.在500 mmol/L,SOS法分离初生猪胰岛产量为171±9.00个/g,青年猪为5840±625个/g,是初生猪的34倍;成年猪为6951±356个/g,是初生猪的41倍,青年猪和成年猪胰岛量均极显著高于初生猪,且二者间无显著差异。由此可知,初生猪Glut2散在分布于胰腺内,青年猪与成年猪Glut2分布于胰岛细胞膜上。初生猪蛋白相对表达量极显著少于青年猪和成年猪,且青年猪显著高于成年猪。初生猪基因相对表达量极显著高于青年猪和成年猪,且青年猪与成年猪未见显著差异。用SOS法分离胚后不同年龄猪胰腺胰岛时,成年猪最适合SOS法的分离,且分离数量最多,为6951±356个/g。