论文部分内容阅读
对牛卵母细胞体外成熟培养的研究,有助于揭示牛卵母细胞的成熟机理,为牛胚胎体外生产技术体系的建立提供依据。本试验重点研究影响牛卵母细胞体外成熟的因素,研究结果如下: 1、将屠宰场采集卵巢的保存温度与保存时间分为二组:20～22℃(8～10h),28～32℃(3～4h)。结果表明,20～22℃(8～10h)组的第一极体可见率(81.4%)、卵裂率(56.1%)和桑/囊胚率(20.8%)与28～32℃(3～4h)组(82.1%,56.7%,21.9%)之间差异均不显著(P>0.05)。结果表明,在卵巢保存温度相对较低的情况下可以保存相对较长的时间而不影响卵母细胞的发育潜力。 2、在成熟培养液中添加10%或20%BFF,培养的牛卵母细胞桑/囊胚发育率(29.9%,28.8%)明显高于添加5%BFF组或没有添加组的桑/囊胚率(22.1%,19.9%,P<0.05)。从而筛选出添加10%BFF有利于牛卵母细胞体外成熟培养。 3、在成熟培养液中添加50ng/mlEGF,卵母细胞的第一极体可见率(88.3%)、卵裂率(64.3%)和桑/囊胚发育率(25.0%)均显著高于不添加组(80.0%,57.8%,20.0%,P<0.05)。结果表明,添加50ng/mlEGF有利于牛卵母细胞体外成熟培养。 4、在成熟培养液中联合添加卵母细胞核成熟抑制剂dbcAMP、dbcAMP+HX和dbcAMP+IBMX抑制性培养6h后解除抑制,再常规培养18h,以dbcAMP+HX组卵母细胞的第一极体可见率(83.3%)、卵裂率(57.4%)和桑/囊胚发育率(22.8%)为高,但与对照组(81.6%,55.8%,20.6%)和其它两组的各项指标间差异不显著(P>0.05)。结果表明,本实验中的抑制剂组合对卵母细胞核成熟的抑制效果不明显,但对其减数分裂能力及受精卵发育力也无明显不利影响。