南昆山毛叶茶（Camellia ptilophylla Chang）是一种天然低或无咖啡碱的珍稀茶树资源,其抗癌、减肥、抗氧化等功能特性已有研究,但通过构建细胞氧化损伤模型评价其抗氧化活性的研究尚未深入,因此本研究以南昆山毛叶茶为主要研究材料,云南大叶种为对照,叔丁基过氧化氢（tert-Butyl hydroperoxide,tBHP）作为诱导剂,构建小鼠成纤维细胞NIH3T3氧化损伤模型。采用四甲基偶氮唑盐（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法测定细胞存活率,乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）检测细胞膜完整性。同时,检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutataione,GSH）含量、铁含量,以及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、过氧化氢酶（catalase,CAT）抗氧化酶活性,评价抗氧化能力,荧光探针测定线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）变化,微板法和蛋白质印迹法（Western blot,WB）检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（cysteinyl aspartate specific proteinase-3,caspase-3）、caspase-9、细胞色素c的表达,以探究其氧化损伤保护机制。主要研究结果如下:（1）两品种茶叶基本理化组成经比色法和高效液相色谱等技术分析表明,南昆山毛叶茶水提物中,反式儿茶素含量高,占总儿茶素的80.70%,其中没食子儿茶素没食子酸酯含量最高,占总儿茶素的54.17%;云南大叶种茶则是顺式儿茶素含量高,占总儿茶素的70.07%,其中表没食子儿茶素没食子酸酯含量最高,占总儿茶素的23.01%。南昆山毛叶茶水提物以可可碱含量最高,占生物碱的99.92%;而云南大叶种茶水提物则以咖啡碱为主,占生物碱的83.51%。即不同于云南大叶传统品种,南昆山毛叶茶具有高反式/低顺式儿茶素,高可可碱/低咖啡碱的特殊化学组成。（2）tBHP诱导小鼠成纤维细胞NIH3T3氧化损伤模型的建立tBHP诱导NIH3T3构建的氧化损伤模型,铺板浓度为5×10~4cell/m L,tBHP诱导损伤剂浓度为200μmol/L,该模型在NIH3T3细胞4～22代内稳定。（3）两品种茶叶水提物抗氧化活性测定在25～100μg/m L浓度范围内,两品种茶叶水提物均对NIH3T3细胞正常生长无毒副作用。经200μmol/L的tBHP处理后,NIH3T3细胞存活率降低为54.00%,细胞形态变化,上清液中LDH含量增高至520.70 U/L。加入25～100μg/m L浓度的两品种茶叶水提物后,细胞存活率升高,LDH含量降低。且南昆山毛叶茶水提物同处理浓度下细胞存活率为云南大叶种的1.35倍,LDH含量为0.73倍,即南昆山毛叶茶细胞抗氧化活性强于云南大叶种。（4）南昆山毛叶茶对tBHP诱导NIH3T3细胞氧化损伤保护作用机理初探抗氧化系列指标表明,200μmol/L的tBHP可使NIH3T3细胞内CAT、SOD、GSH-Px抗氧化酶活力降低,细胞内铁、MDA含量增加,GSH含量降低,ROS大量蓄积,MMP降低,诱导NIH3T3细胞发生线粒体凋亡,最终导致细胞氧化损伤。而加入25～100μg/m L浓度的南昆山毛叶茶水提取物后,提高了CAT、SOD、GSH-Px酶活力,分别为tBHP组的1.42倍、1.77倍、2.48倍,降低细胞内铁和MDA含量,分别为tBHP组的0.19倍和0.02倍,GSH含量提高至tBHP组的3.07倍,减少ROS积累,维持MMP正常,抑制caspase-3、caspase-9、细胞色素c的表达。说明南昆山毛叶茶水提物能修复抗氧化系统,抑制线粒体细胞凋亡途径,有效缓细胞氧化损伤。