【摘 要】
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目的:探讨食管鳞癌Eca109细胞中,经炎性因子白介素6（IL-6）诱导激活Jak2/Stat3信号通路促使PD-L1表达升高的调控过程中,Survivin对Smad3及PD-L1的调控作用。方法:1)选用IL-6诱导食管鳞癌Eca109细胞6、12、24小时,激活Jak2/Stat3信号通路,使用Western blot方法检测p-Jak2、Jak2、p-Stat3、Stat3、Survivin
【基金项目】
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Survivin通过IKKβ调控食管鳞癌细胞自噬晚期过程的分子机制的研究（国家自然科学基金;项目编号:81660459）； 食管癌细胞株中Survivin,tak1及NFκB表达调控的分子机制研究（自治区创新环境（人才、基地）建设专项---自然科学基金项目;项目编号:2018D01C180）；
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目的:探讨食管鳞癌Eca109细胞中,经炎性因子白介素6（IL-6）诱导激活Jak2/Stat3信号通路促使PD-L1表达升高的调控过程中,Survivin对Smad3及PD-L1的调控作用。方法:1)选用IL-6诱导食管鳞癌Eca109细胞6、12、24小时,激活Jak2/Stat3信号通路,使用Western blot方法检测p-Jak2、Jak2、p-Stat3、Stat3、Survivin、p-Smad3、Smad3、PD-L1蛋白表达量的变化;2)在IL-6诱导下,使用Jak2/Stat3信号通路抑制剂AG490干预Eca109细胞24小时,检测p-Jak2、Jak2、p-Stat3、Stat3、Survivin、p-Smad3、Smad3、PD-L1蛋白表达水平变化;3)在IL-6诱导下,使用Svv-si RNA及Survivin抑制剂YM155干预Eca109细胞24小时,检测Survivin、p-Smad3、Smad3、PD-L1蛋白表达量的变化,观察其相互调控关系;4)在Eca109细胞中转染Smad3过表达质粒,使用IL-6诱导24小时后,检测p-Smad3、Smad3、PD-L1蛋白表达量的变化,观察Smad3对PD-L1的影响;5)应用流式细胞术检测不同分组的细胞凋亡情况。结果:1)使用IL-6诱导Eca109细胞6、12、24小时后,Western blot检测结果显示,p-Jak2、Jak2、p-Stat3、Stat3、Survivin、p-Smad3、Smad3、PD-L1的蛋白表达量升高,以12、24小时最为明显;2)使用抑制剂AG490干预24小时后,p-Jak2、Jak2、p-Stat3、Stat3、Survivin、p-Smad3、Smad3、PD-L1的蛋白表达水平均下调;3)使用Svv-si RNA沉默Survivin表达的同时下调了p-Smad3、Smad3和PD-L1的表达;4)YM155在抑制Survivin表达的同时降低了p-Smad3、Smad3和PD-L1的表达;5)转染Smad3过表达质粒后Eca109细胞中PD-L1的表达水平随Smad3表达升高而上调;6)使用YM155及Svv-si RNA干预后,促进食管鳞癌Eca109细胞的凋亡。结论:在食管鳞癌Eca109细胞中,IL-6激活Jak2/Stat3信号通路后,Survivin参与并调控Smad3和PD-L1的表达,存在Survivin对Smad3和PD-L1的正向调控关系。提示Survivin可能通过参与调节肿瘤的免疫逃逸,从而影响食管癌的发生发展,为靶向PD-L1的免疫治疗提供可靠的实验依据以及理论基础。
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