木材降解物及温度光照对灵芝液体发酵三萜类物质产量的影响

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通过降解木材获取自身生长所需要营养物质是许多真菌赖以生存的主要手段。这些真菌包括在我们膳食中扮演重要角色的菇类,如灵芝。灵芝是大型腐生真菌,在东南亚国家尤其是中国已有数千年的应用史。灵芝三萜是灵芝中重要的药用成分,主要产生于灵芝子实体和原基阶段,在菌丝体阶段产量很少或不产生。在本研究中,我们分析了木材降解产生的化合物对灵芝菌丝体发酵生产灵芝三萜的诱导作用,通过优化浓度和添加时间,结果表明,在总共12种测试化合物中,微晶纤维素效果最为显著,其次是半乳糖。在第三天添加1.50%的微晶纤维素可使灵芝三萜产量提高85.96%,而添加0.50%的D-半乳糖则可使灵芝三萜产量提高58.90%。荧光定量PCR分析表明,添加微晶纤维素和D-半乳糖后,3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)、鲨烯合酶(SQS)、羊毛甾醇合酶(LAS)基因表达量增加,分别为对照的2.00倍、4.00倍、2.50倍。本研究还分析了光温对发酵生产灵芝三萜的量的作用效果。在不影响灵芝菌丝体生长的前提下,4 ℃可使灵芝三萜产量提高33.30%,37 ℃可使灵芝三萜产量提高27.80%,光暗交替虽然没有影响灵芝三萜的积累,但是增加了灵芝菌丝体的生物量。荧光定量PCR分析结果显示,高低温和光暗刺激均促进了关键基因的表达,其中,4 ℃刺激最显著,上游HMGR、中游SQS和下游LAS基因表达量均增加,分别为对照的3.00倍、20.00倍和3.50倍。
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