硬皮病患者外周血CD4<'+>T、CD8<'+>T淋巴细胞CD40LG的表达水平

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目的:近年来研究发现CD40/CD40LG共刺激分子通路在许多自身免疫性疾病的发病机理中发挥着重要作用,为探讨CD40LG在硬皮病发生中所起的作用,我们检测硬皮病患者CD4+T细胞、CD8+T细胞中CD40LG的表达水平。方法:(1)密度梯度离心分离正常人、病人的外周血单个核细胞,磁珠分离CD4+T细胞、CD8+T细胞;(2)试剂盒提取RNA和DNA;(3)实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR)检测CD40LG的mRNA的表达。(4)流式细胞仪检测CD4+T细胞、CD8+T细胞中CD40LG表达水平;结果:(1)系统性硬皮病患者CD4+T、CD8+T细胞中CD40LG的mRNA水平均较对照组明显升高(p=0.045,p=0.003);局限性硬皮病患者CD4+T、CD8+T细胞中CD40LG的mRNA水平较对照组明显升高(p=0.024,p=0.043);系统性硬皮病与局限性硬皮病患者CD4+T、CD8+T细胞中CD40LG的mRNA水平无明显差异(p=0.75,p=0.13)。(2)流式细胞仪检测结果:与正常对照组相比,系统性硬皮病患者CD4+T细胞、CD8+T细胞中CD40LG的表达水平均明显升高(p=0.000,p=0.001);局限性硬皮病患者CD4+T细胞、CD8+T细胞中CD40LG的表达水平均明显升高(p=0.000,p=0.000);系统性硬皮病与局限性硬皮病患者CD4+T细胞、CD8+T细胞中CD40LG的表达水平无明显差异(p=0.43,p=0.24)。结论:CD40LG在系统性、局限性硬皮病患者CD4+T细胞、CD8+T细胞中的表达水平均明显增高,可能在硬皮病的发病过程中起着重要作用。
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