有机磷类药物两种检测方法的建立

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:panda_chris
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有机磷(Organophosphorus,OPPs)是一类含磷有机化合物,用于防治植物病虫害,具有很强的杀虫、杀菌能力。由于成本低、药效高、半衰期短等优点,OPPs被广泛应用于农业领域。然而,由于OPPs的不规范使用,导致其在环境当中大量残留。这些残留在环境当中的OPPs会通过食物链威胁人类健康。本论文基于分子印迹技术,开发了两种不同的检测方法,以期达到快速、准确、廉价检测OPPs的目的,包含以下两部分:(1)以蝇毒磷为模板分子制备了分子印迹聚合物(Molecular imprinted polymer,MIP),并利用MIP开发了一种竞争化学发光法来检测牛奶当中的有机磷,其中MIP作为识别元件。首先利用Chem3D软件分析七种待测OPPs的二维和三维结构图,结果显示七种待测OPPs具有一样的母核结构,均为硫代磷酸酯类结构,键角在102°~115°之间。将合成的MIP包被在96孔板上,再加入OPPs标准品溶液和酶标物在孔内进行竞争吸附。孵育完成后,使用鲁米诺-H2O2系统产生化学发光信号用以检测OPPs。结果显示,七种OPPs的检测限在1~3 pg/mL,半数抑制浓度为1~20 ng/mL,日内回收率在86.1%~86.5%之间,日间回收率在83.6%~94.2%之间。本研究建立的基于MIP的竞争化学发光法,具有操作简单、选择性好、灵敏度高、可重复的优点,综合了 MIP、ELISA和化学发光的优点,适用于大批量筛选牛奶样品。(2)以蝇毒磷为模板分子制备了分子印迹微球(Molecularly imprinted microspheres,MIM),将 MIM 和类石墨相氮化碳(Graphitic carbon nitride,g-C3N4)构建成一种复合材料,对乳制品中痕量OPPs进行富集、纯化和检测。首先,将复合材料置于一个空的SPE柱中,压实后用水和乙腈活化。活化之后将OPPs标准品缓速流过柱子,再用洗脱溶剂将吸附的OPPs洗脱。用氮气将洗脱液吹干,再将残留物用甲醇复溶,最后用UPLC检测。结果显示,四种待测OPPs在1~10000 ng/mL范围内具有良好的线性关系(r2>0.999),检测限为0.7~2.6 ng/mL,空白乳品样品的回收率为86.4%~95.3%。这些结果表明,该复合材料是一种检测乳制品中OPPs的理想材料。目前,常用的检测方法存在一些不足之处,例如检测成本高、操作复杂、耗时较长等。本研究开发的两种基于分子印迹技术的检测方法成本较低,操作简单且可以重复使用,可以作为检测乳制品中OPPs的新型方法。
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