复方石菖蒲对癫痫动物行为学改变和海马神经元氨基酸递质表达的影响

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目的观察复方石菖蒲(CSCP)对戊四唑(PTZ)致痫动物模型的影响。方法(1)对PTZ致痫小鼠行为学及海马结构的影响:昆明种小鼠60只,雌雄各半随机分为6组:空白组,模型组,苯妥英钠(PHT)组,CSCP高(4000mg·kg-1)、中(2000mg·kg-1)、低(1000mg·kg-1)剂量组,空白组和模型组给予等量生理盐水除外,其他组别给予对应药物,连续灌胃(ig)7天,末次给药1h后,腹腔注射PTZ80mg·kg-1(空白组除外),造成急性癫痫模型,观察CSCP对PTZ致痫小鼠的发作潜伏期、行为分级、发作次数等的影响;采用脑组织切片HE染色观察海马结构的改变;(2)对PTZ慢性点燃大鼠痫性发作的影响:①观察CSCP对PTZ慢性点燃大鼠行为学(发作级别、潜伏期、发作次数)的影响;②CSCP对PTZ慢性点燃大鼠大脑皮质SOD、T-AOC活力及MDA含量的影响;③荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)方法检测CSCP对PTZ慢性点燃大鼠多重耐药基因MDR1、MRP1、caspase-3表达的影响;④免疫组化法(IHC)分析CSCP对PTZ慢性点燃大鼠海马CA1、CA3、齿状回(DG)区GABA、GLU、GFAP等神经递质表达的影响,观察其治疗癫痫的疗效。I结果:(1)对PTZ致痫小鼠行为学及海马结构的影响: CSCP可改善痫性小鼠的发作程度,延长轻度发作潜伏期,减少Ⅳ、Ⅴ级癫痫发作次数;观察HE染色切片可见PTZ致痫小鼠海马结构发生改变,细胞数量减少,苯妥英钠和CSCP可有效抑制。(2)对PTZ慢性点燃大鼠痫性发作的影响:①PTZ慢性点燃大鼠均能成功建立模型,与模型组比较,CSCP高剂量组能改善痫性大鼠发作程度,减少发作次数(P﹤0.05,P﹤0.01);②检测大鼠脑组织SOD、T-AOC活性及MDA含量显示,与模型组相比,CSCP高、中剂量组SOD、T-AOC活性高于模型组(P﹤0.05),而MDA含量则明显低于模型组(P﹤0.05);③FQ-PCR检测MDR1、MRP1、 caspase-3的表达,VPA组与CSCP高剂量组均可减少MDR1表达,可能是两者都对癫痫得到了一定控制及抑制了MDR1的药物转运泵功能,使其表达量降低。VPA组与CSCP高剂量组均降低caspase-3的表达;④CSCP高、中剂量组对PTZ慢性点燃大鼠海马CA1区可减少GLU表达,提高GABA含量、抑制GFAP的异常表达,而对CA3、齿状回(DG)区无影响。结论: CSCP对PTZ诱导癫痫动物模型有一定的治疗作用,其作用机制可能是通过提高大脑抗氧化能力,抑制耐药基因表达、协调兴奋性与抑制性神经递质含量的平衡达到治疗作用,具体抗痫机制有待进一步探讨。
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