【摘 要】
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目的:探讨同种异体纳米脂肪联合富血小板血浆应用于压力性损伤创面的修复效果及潜在作用机制,从而为压力性损伤创面的临床治疗提供一种新的方案。方法:预实验时,购买6只6周龄SPF级SD大鼠,参照非侵入性压力性损伤造模方式建立压力性损伤动物模型,建模完成后第1天及第5天取创面标本进行HE染色,确定压力性损伤模型建立成功。正式实验时,购置46只SPF级SD大鼠,其中6只8周龄,40只4周龄,屏障环境下试养2
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目的:探讨同种异体纳米脂肪联合富血小板血浆应用于压力性损伤创面的修复效果及潜在作用机制,从而为压力性损伤创面的临床治疗提供一种新的方案。方法:预实验时,购买6只6周龄SPF级SD大鼠,参照非侵入性压力性损伤造模方式建立压力性损伤动物模型,建模完成后第1天及第5天取创面标本进行HE染色,确定压力性损伤模型建立成功。正式实验时,购置46只SPF级SD大鼠,其中6只8周龄,40只4周龄,屏障环境下试养2周。6只8周龄SD大鼠作为供体,腹股沟内取脂肪制备纳米脂肪,腹主动脉采血制作富血小板血浆。40只4周龄SD大鼠建模后随机分为4组,即纳米脂肪联合富血小板血浆处理组（NP组）、纳米脂肪处理组（N组）、富血小板血浆处理组（P组）、磷酸缓冲盐溶液处理组（C组）。建模后第1天给予相应的处理,处理后第1、3、5、7、10、14天拍照观察创面愈合情况。第5、10、14天取创面组织进行组织学检测,HE染色观察创面组织炎性反应情况及结构变化,Masson染色观察创面胶原沉积、排列情况,CD31免疫组织化学检测创面新生血管情况,MCP-1免疫组化检测创面愈合早期炎性因子表达情况,蛋白质免疫印迹检测压力性损伤创面血管内皮生长因子表达情况。结果:（1）压力性损伤模型建立成功。3个循环建模后见创面凹陷,创周红肿,表面痂皮形成。第1天创面HE染色示组织水肿,结构层次紊乱,可见少量炎性细胞浸润,第5天组织创面空泡结构,层次紊乱,组织细胞变性坏死,大量炎性细胞浸润。（2）成功制备富血小板血浆。富血小板血浆内血小板计数为:（2219.3±312.5）×10^9/L,供体SD大鼠正常全血血小板计数为:（360.6±62.1）×10^9/L,达到PRP制备要求。（3）各组创面不同时间点拍照结果对比,NP组创面愈合时间最短,第5天创面痂皮开始部分脱落,第14天创面基本愈合,在第3、5、7、10、14天创面愈合率均明显高于C组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。HE结果示:NP组、N组、P组早期炎性细胞浸润较C组明显,NP组肉芽组织生长、真皮层增厚、皮肤附属器再生、再上皮化较其他组迅速。Masson染色结果示:第5天,NP组创面胶原表达高于其余3组,N组及P组也明显高于C组（P＜0.05）。第10、14天,相比于其他组,NP组创面胶原沉积较多,排序更有序。N组及P组胶原表达差异不明显,但均高于C组。CD31免疫组化结果示:第5、10、14天,NP组新生血管数目均明显高于其他组,N组、P组血管新生数目大致相同,但均高于C组（P＜0.05）。MCP-1免疫组织化学染色观察到愈合早期MCP-1在痂下及创缘组织中表达明显,NP组表达量明显高于N组、P组,后两者又高于C组（P＜0.05）。Western blot检测结果表明:第5天时,NP组VEGF表达量高于其余3组,N组、P组、C组间无明显差异。第10天,NP组VEGF表达量明显高于P组,P组明显高于N组及C组,后两者无明显差异。第14天,相比于其余3组,NP组VEGF表达仍具有明显优势,N组及P组趋于一致,均高于C组。结论:（1）纳米脂肪联合富血小板血浆治疗压力性损伤创面具有显著效果,为临床应用纳米脂肪、富血小板血浆移植治疗压力性损伤创面提供动物实验基础。（2）纳米脂肪与富血小板血浆联合使用可以发挥协同作用,为压力性损伤创面的临床治疗提供一种新的方案。（3）调控压力性损伤创面的炎性反应及微血管生成是促进创面愈合的关键,纳米脂肪联合富血小板血浆能明显提高压力性损伤创面VEGF表达,愈合早期刺激炎性细胞浸润,促进创面愈合。
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