锑对斑马鱼神经发育及行为学的影响

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自人类全面进入工业化时代以来,采矿业和化工业蓬勃发展,致使大量金属污染物进入水土环境中。其中,大部分金属污染物难以被微生物降解,并通过食物链逐渐富集,最终得以进入人体内,严重威胁人类健康。锑是一种带有银色光泽的金属,在自然界中主要以+3价和+5价化合物形式存在。已有的研究表明锑及其化合物存在毒性,可能诱发呼吸系统、循环系统以及内分泌系统疾病,并揭示了相关的细胞或分子机制。然而,锑对神经系统的毒性及其机制却鲜有报道。为了探究这一问题,我们利用模式生物斑马鱼的胚胎和成鱼,从表型与行为、器官、组织、细胞和分子等不同层面探究了锑对斑马鱼神经系统的影响。研究结果表明锑对斑马鱼具有一定的神经毒性。在幼鱼中取得的主要研究结果如下:一、锑溶液处理后,斑马鱼胚胎出现表型变化,主要表现为体长缩短、形态发育畸形、心率下降,且随处理浓度升高而愈发严重。二、在行为学实验中,随着锑浓度的升高,斑马鱼幼鱼在19-27 hpf期间自发运动频率降低;在27 hpf和36 hpf时触尾反应水平下降;在120 hpf时自由运动距离缩短、速度减慢,且其轨迹显得混乱无序。三、使用组织特异性荧光的转基因鱼系Tg(flk:EGFP)、Tg(gfap:GFP),结合激光共聚焦成像发现锑导致斑马鱼脑血管减少和畸形;脑部Gfap的表达强度和分布也发生了明显的变化。四、为了进一步探究锑的神经毒性机制,我们检测了斑马鱼体内活性氧水平、神经递质系统标记物活性、标记基因的表达等指标,发现随着锑浓度的升高,斑马鱼体内的活性氧水平逐渐升高,抗氧化酶活性或含量降低;乙酰胆碱酯酶活性、神经发育相关标志物gfap、nestin、mbp和shha的表达量降低。另外,我们还初步探索了锑对斑马鱼成鱼的神经毒性,处理组成鱼体色变深、运动减缓且协调性变差;T迷宫实验发现处理组成鱼的学习和记忆能力衰退;对成鱼脑组织切片分别进行HE染色、LFB髓鞘染色、刚果红染色和尼氏体染色处理,我们观察到锑显著抑制了斑马鱼脑神经元的正常发育。综上所述,本研究表明水土环境中的锑离子可以通过升高体内氧化应激水平、抑制神经递质功能以及干扰部分神经相关基因的表达来损害斑马鱼神经系统的结构与功能,最终导致生物体出现异常的表型和行为。这些结果不仅促进了我们对锑的神经毒性的认识,也提示我们锑在环境中的富集和传递可能对人类的神经系统构成潜在的不良影响。
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