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抑郁症,又称抑郁障碍,是临床精神科或心理科常见的一种慢性疾病,以持续情绪低落为其主要特征。抑郁症在中国大陆人群中属于高发疾病之一,然而人们对其病理机制还没有明确的认识,一般认为抑郁症是多种因素引起的情绪障碍。目前的治疗方法也不理想,且都需要花费至少两周以上时间才可能产生效果,给患者造成了巨大的身心负担,因此开发作用更加突出、效果更加迅速的治疗方法一直都是抑郁症研究的重点方向。其实早在1966年就有学者发现抑郁患者在一夜不眠后抑郁症状得到了明显的缓解,2017年有人整理了66篇睡眠剥夺缓解抑郁症状的相关研究,对其有效率进行定量Meta分析,结果表明睡眠剥夺能有效减轻大约一半患者的抑郁症状,但其具体机制仍不清楚。目前越来越多的抗抑郁药物研究提示谷氨酸系统在调节抑郁症的发生和治疗中可能起重要作用,其中代谢型谷氨酸受体5（metabotropic glutamate receptor 5,mGluR5）的作用更值得关注,因为已有研究指出mGluR5可能与抑郁症的发病机制及睡眠剥夺的抗抑郁效果密切相关。慢性痛也是一种常见的慢性疾病,全球发病率超过33%。大量的临床调查发现,长期的慢性痛患者经常会并发恶性的负性情绪,比如焦虑、抑郁等,因此解决慢性疼痛并发的负性情绪也是迫切需要关注的问题。本研究拟利用坐骨神经分支选择损伤术（spared nerve injury model,SNI）建立小鼠慢性痛伴发负性情绪的动物模型,综合运用多种行为学研究方法,并以内侧前额叶皮层（medial prefrontal cortex,mPFC）为靶区,探讨mGluR5参与睡眠剥夺快速抗抑郁效果的作用机制。具体实验分为两个部分:第一部分睡眠剥夺对慢性神经病理性痛动物模型并发的抑郁样行为的影响目的:探讨慢性神经病理性痛不同时程小鼠行为学的改变,以及睡眠剥夺对慢性痛并发抑郁样行为的影响。方法:采用SNI方法建立神经病理性痛小鼠模型,利用旷场、高架十字实验评价SNI小鼠的焦虑样行为,利用悬尾、糖水偏好实验评估SNI小鼠的抑郁样行为,利用Von-Frey方法和热痛仪检测SNI小鼠的机械及热痛反应;采用改良多平台水环境法和温和处理法对不同时间段的抑郁样小鼠进行睡眠剥夺,评价睡眠剥夺对小鼠焦虑和抑郁样行为的影响。结果:SNI模型组小鼠手术侧下肢机械和热痛阈值持续低于对照组,40 d后出现稳定的焦虑样行为,60 d左右出现显著的抑郁样行为,睡眠剥夺6 h、12 h、24 h均可明显缓解SNI小鼠的抑郁样行为,但是对焦虑样行为和机械痛敏没有明显影响。结论:坐骨神经分支选择损伤手术后的小鼠慢性痛持续存在,并引发了小鼠的情绪调节障碍,且疼痛时程越长越严重,可作为理想的继发性抑郁动物模型;6h睡眠剥夺在不影响慢性疼痛的前提下可明显缓解抑郁症状,但不影响焦虑样行为。第二部分mGluR5参与小鼠睡眠剥夺快速抗抑郁作用的机制研究目的:探讨mGluR5在小鼠睡眠剥夺快速抗抑郁效果中的作用机制。方法:SNI方法制备神经病理性痛小鼠伴发负性情绪的动物模型,利用悬尾实验和糖水偏好实验评估小鼠的抑郁样行为;采用温和处理的方法对有抑郁样行为小鼠进行6 h睡眠剥夺,并评估睡眠剥夺对小鼠抑郁样行为的影响;通过micro-PET/CT显像显示SNI模型与假手术组小鼠全脑mGluR5标记信号强弱对比;采用Western-Blot方法检测SNI模型及睡眠剥夺后小鼠mPFC内mGluR5总蛋白和质膜蛋白表达水平的变化;进一步对全脑神经元、GABA能神经元和PV+神经元mGluR5敲除小鼠进行睡眠剥夺前后的行为学检测。结果:抑郁情绪及睡眠剥夺对mPFC内mGluR5总蛋白表达水平无影响,但micro-PET显像显示SNI模型全脑mGluR5标记信号升高;SNI伴发抑郁样行为小鼠mPFC内mGluR5质膜蛋白上调,而睡眠剥夺可下调其表达量;全脑神经元mGluR5敲除小鼠应激刺激后表现出抑郁样行为,GABA能神经元mGluR5敲除(Gad2-mGluR5-/-)小鼠表现出抗抑郁样行为,而PV+神经元mGluR5敲除(PV-mG5R-/-)小鼠则表现出抑郁样行为,且睡眠剥夺对其抑郁样行为无缓解作用。结论:小鼠mPFC内mGluR5质膜蛋白表达量的改变可能参与小鼠抑郁调控;不同类型神经元mGluR5在抑郁症调控中发挥不同的作用,其中PV+神经元的mGluR5在抑郁样行为的发生和睡眠剥夺的抗抑郁效果中可能发挥着重要的作用。