目前,三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer,TNBC）的治疗是世界性的难题,化疗抵抗且缺乏有效靶向治疗是其化疗失败的关键原因。课题组前期利用超声靶向破坏微泡（ultrasound targeted microbubbles destruction,UTMD）、RNA干扰及纳米技术建立了一种新型靶向安全的载体递送平台,逆转了HER2阳性乳腺癌对阿霉素的耐药性,为TNBC的靶向治疗提供了可能手段。针对TNBC,仍需找到特异治疗靶点、实现精确定位的化疗增敏及进行影像化评估。紫杉醇（Paclitaxel,PTX）是目前治疗TNBC的一线化疗药物,但它缺乏肿瘤靶向性而且细胞内药物浓度不足以致不能有效杀灭TNBC细胞。X-盒结合蛋白1（X-box binding protein 1,XBP1）在TNBC的发生、发展及复发等各环节起着关键性的作用,阻断XBP1基因的表达有望抑制TNBC的发生发展,改善预后。本研究分为两部分:第一部分,我们设计了一种RGD靶向载PTX脂质微囊诊疗体（PTX@RGD-MBs）,联合UTMD技术来更好诊断TNBC的同时提高其治疗效果,考查TNBC的诊疗一体化。第二部分,我们以TNBC特异性的XBP1为靶基因,制备了内部载XBP1-si RNA及紫杉醇、表面修饰EGFR及整合素αvβ3双重抗体的微囊,UTMD促进微囊更多进入肿瘤,双重抗体识别瘤细胞,微囊内基因及药物在肿瘤部位共同行强有力的抑制,实现精确定位的化疗增敏同时进行超声成像,以期建立TNBC靶向辅助治疗的新模式。第一部分靶向载PTX脂质微囊联合UTMD可视化治疗三阴性乳腺癌的实验研究目的:评估RGD靶向载PTX脂质微囊（PTX@RGD-MBs）联合UTMD技术诊断和治疗TNBC的效果。方法:制备及表征PTX@RGD-MBs;评价PTX@RGD-MBs联合UTMD体外杀伤三阴型乳腺癌MDA-MB-231细胞的效果;超声造影评估PTX@RGD-MBs体内外成像效果。结果:PTX@RGD-MBs大小均一,PTX的包封率达到91.07±2.51%,载药量达到4.01±0.05%。PTX@RGD-MBs经UTMD作用后微囊破裂可快速释放PTX。空载脂质微囊对MDA-MB-231细胞的毒性极低。PTX@RGD-MBs联合UTMD促进了MDA-MB-231细胞更多地摄取微囊,从而对MDA-MB-231细胞产生最大的杀伤作用。另外,PTX@RGD-MBs在体内外均可获得满意的超声造影图像。结论:PTX@RGD-MBs联合UTMD技术不仅可以提高其杀伤TNBC细胞的能力,同时它还是一种较好的超声对比增强剂,有助于TNBC肿瘤的诊断,从而实现三阴性乳腺癌的诊疗一体化。第二部分双靶向载PTX-XBP1-si RNA PLGA-PEG微囊联合UTMD可视化增敏三阴性乳腺癌化疗的实验研究目的:评估EGF和RGD双靶向载PTX-XBP1-si RNA PLGA-PEG微囊（EGF RGDMBs-PTX-XBP1-si RNA,A-MBs-PTX-XS）联合UTMD诊断和治疗TNBC的效果。方法:制备及表征A-MBs-PTX-XS,采用倒置荧光显微镜及流式细胞仪评价A-MBs-PTX-XS被MDA-MB-231细胞摄取情况,采用MTT法检测A-MBs-PTX-XS联合UTMD体外对MDA-MB-231细胞的杀伤作用。建立裸鼠TNBC移植瘤模型,评价A-MBs-PTX-XS联合的抗肿瘤效果及毒副作用。超声造影评估A-MBs-PTX-XS体内外成像效果。结果:A-MBs-PTX-XS大小均一,PTX的包封率达到98.35±0.46%,载药量达到1.50±0.05%,XBP1-si RNA的包封率达到95.14±0.08%。A-MBs-PTX-XS经UTMD作用后破裂并快速释放包载的PTX和XBP1-si RNA。A-MBs-PTX-XS联合UTMD促进了MDA-MB-231细胞更多地摄取微囊,显著下调了XBP1蛋白的表达,在体外对MDA-MB-231细胞产生最大的杀伤作用,在体内能够显著抑制裸鼠肿瘤的生长,而且毒副作用最小。另外,A-MBs-PTX-XS在体内外均可获得满意的超声造影图像。结论:A-MBs-PTX-XS联合UTMD技术大大增强了PTX和XBP1-si RNA体内外抗TNBC肿瘤的能力,明显减少了药物的毒副作用。同时它还是一种较好的超声对比增强剂,有助于TNBC肿瘤的诊断,从而实现三阴性乳腺癌的诊疗一体化。