两种蛋白质的电化学免疫传感

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电化学生物传感器基于生物识别或生物催化原理以及电化学信号输出和放大技术,具有灵敏度高、检测下限低、选择性好、操作简便和成本低等优点,在食品安全、生物医药和环境分析等领域具有重要的研究和应用价值。因为生物识别和生物催化本身具有高特异性,故提高生物传感器的灵敏度一直是其核心科学问题。本学位论文中,我们在简要综述免疫电化学传感器及其信号放大近期进展的基础上,基于生物亲和反应、生物标记和电化学信号放大等技术,研究了半乳糖凝集素-3(Galectin-3,Gal-3)和N末端B型利钠肽原(nitrogen-terminal pro-B-type natriuretic peptide,NT-pro BNP)的灵敏电化学传感。主要内容如下:1.利用电还原的羧基化石墨烯共价固定一抗,吸附亚甲基蓝(MB)和纳米金(Au NPs)的氨基化介孔二氧化硅用做二抗标记物,构建了Gal-3高性能双信号电化学免疫传感器。采用电化学方法、石英晶体微天平、扫描电子显微镜和能量色散谱对相关电极和材料进行了表征。优化条件下,基于原位微升滴伏安法检测MB的信号输出,Gal-3的线性检测范围(LDR)为50 fg m L-1~500 ng m L-1,检测下限(LOD)(S/N=3)为2.0 fg m L-1;基于原位微升滴阳极溶出伏安法检测Au NPs的信号输出,Gal-3的LDR为0.5 fg m L-1~500 ng m L-1,LOD(S/N=3)为0.17 fg m L-1。临床血清样品的Gal-3检测结果满意。本研究可能有助于金属纳米材料和其他电活性物质标记的高敏伏安生物分析。2.将Cu2+-1,3,5-苯甲酸的金属-有机框架(HKUST-1 MOFs)作为二抗标记物,利用原位微升滴阳极溶出伏安法直接在玻璃碳免疫电极上、0.1 M HNO3+1 M Na Cl水溶液中检测Cu2+,实现了N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)的免疫传感。采用电化学方法、石英晶体微天平、扫描电子显微镜和能量色散谱对材料和电极进行了表征。在优化条件下,其检测下限(S/N=3)为0.33 fg m L-1,临床血清样品中分析NT-pro BNP获满意结果。
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