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目的:病理性瘢痕是比较常见的一类疾病,是皮肤损伤后创面异常修复的结果,包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩。瘢痕的遗留常影响美观,给患者造成心理负担和精神压力,严重者可导致局部功能障碍或影响邻近器官的功能。近些年的研究证明病理性瘢痕形成的机制是非常复杂的,影响因素更是繁多,对于病理性瘢痕目前尚无令人满意的治疗方法。
内分泌系统作为人体重要的调节系统与瘢痕的发生、发展及转归有着密切的联系。皮肤是性激素的靶器官之一,性激素通过相应的性激素受体发挥调节作用。临床资料表明不同的性别、年龄之间,尤其是女性妊娠期随着体内性激素水平的变化,瘢痕的形成都会有所变化,提示性激素在瘢痕的形成过程中发挥着一定的作用。
本实验的目的是通过对妊娠期和非妊娠期的正常皮肤和增生性瘢痕、瘢痕疙瘩中雌激素受体((ER)、孕激素受体((PR)和雄激素受体(AR)表达水平的检测,以探讨性激素受体在病理性瘢痕的发生,发展过程中的作用,为病理性瘢痕的抗性激素治疗提供一定的理论基础。
方法:组织标本取自2006年2月~2006年12月中国石油天然气集团公司中心医院妇产科及外科的住院及门诊手术治疗病例,其中增生性瘢痕腹部皮肤:孕期20例、非孕期20例。瘢痕疙瘩孕期和非孕期各10例,以同期手术切除的正常腹部皮肤:孕期10例、非孕期10例作为对照。切除的组织标本部分立即置于液氮中保存,胶原酶V消化后采用Trizol法提取RNA,随机引物合成cDNA,采用半定量逆转录一聚合酶链反应(simi-quantify reverse transcription poly.merase chain reaction,RT-PCR)检测雌激素受体、孕激素受体及雄激素受体的表达。部分用4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,制成5岬的组织切片。以HE染色观察组织学改变,应用免疫组织化学SP法对组织切片中雌激素受体、孕激素受体及雄激素受体的表达进行检测,以胞核或胞浆中出现特异性棕黄色着色的为阳性细胞。对观察结果应用SPSS 11.0统计软件进行统计学分析,各组及对照组间的比较采用多个独立样本非参数检验的多组等级/频数表资料的比较。以P<0.05为差别有统计学意义。
结果:
1 正常皮肤、增生性瘢痕组织中均可表达ER、PR和AR。表达部位位于表皮基底层、成纤维细胞、汗腺及血管内皮细胞。
2 正常非妊娠皮肤中ER、PR、AR表达的阳性率分别为30%,20%,20%;正常妊娠皮肤中ER、PR、AR表达的阳性率分别为40%,30%,40%;非妊娠增生性瘢痕组织中阳性率分别为60%,55%,40%;妊娠期增生性瘢痕组织中的阳性率分别为85%,65%,65%;非妊娠瘢痕疙瘩中分别为70%,40%,60%;妊娠期瘢痕疙瘩中分别为90%,55%,80%。
3 半定量RT-PCR检测显示:正常非妊娠皮肤中ER、PR、AR的相对表达量分别为0.864,0.236,0.538;正常妊娠皮肤中ER、PR、AR的相对表达量分别为0.985,0.593,0.887:
非妊娠增生性瘢痕组织中相对表达量分别为1.077,0.978,0.964;妊娠期增生性瘢痕组织中相对表达量分别为1.205,1.083,1.079;非妊娠瘢痕疙瘩中分别为1.263,0.824,1.264:妊娠期瘢痕疙瘩中分别为1.401,0.939,1.339。
4 经统计学分析表明:在瘢痕组织中ER、PR、AR的表达高于正常皮肤组织,差异均有统计学意义(P<0.05);孕期ER,AR的表达高于非孕期,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论:
1 ER,PR,AR在正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中均有阳性表达,但表达阳性率不同。组织中ER表达阳性率由高到低依次为瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、正常皮肤;PR的表达阳性率由高到低依次为增生性瘢痕、瘢痕疙瘩和正常皮肤(无统计学意义);AR表达阳性率由高到低依次为瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、正常皮肤;
2 ER,AR在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的发生及发展中起一定的作用。PR在病理性瘢痕中的作用不明显。
3 孕期女性的ER、AR表达水平高于非孕期女性,在孕期瘢痕增生过程中发挥一定作用。