蛋白质的稳定性不仅在发挥其生物功能时具有重要的作用，而且在蛋白质工程，包括蛋白质设计，再折叠、贮存和运输中具有重要的意义。肌酸激酶(CK)是研究蛋白质折叠和稳定性的一个理想的模型蛋白。本文应用酶动力学和平衡态方法，研究了海藻糖和氧化三甲胺两种渗透剂对人脑型肌酸激酶（hBBCK）稳定性的作用。实验结果如下：　　 热失活研究显示海藻糖能有效防止hBBCK的热失活和热变性。1.0 M 海藻糖使hBBCK热失活的半失活温度(Tm)升高了4.6℃，活化能由原来的29.7 kJ·mol-1 升高到 41.1 kJ·mol-1。内源荧光光谱研究显示在海藻糖浓度分别为0 M, 0.6 M, 0.8 M和 1.2 M时，hBBCK热变性的表观转变温度(T1/2)相应的从43.0℃上升到 46. 5℃, 47.7℃和 49.9℃。内源荧光和ANS外源荧光光谱研究表明海藻糖的疏水作用可能对hBBCK的热稳定性起了重要作用。hBBCK复性动力学实验研究表明海藻糖能有效抑制hBBCK复性时过程中聚集体的形成。　　 脲变性实验表明海藻糖能抑制脲引起的hBBCK的失活和变性。与肌肉型肌酸激酶一样，人脑型肌酸激酶的脲变性也为四态过程，分别在3.0 M-4.0 M脲和5.0 M-6.0 M脲浓度之间有中间体的出现。内源荧光和荧光相图法表明海藻糖的存在改变了hBBCK脲变性去折叠时的四态过程。海藻糖稳定了hBBCK的中间体结构，延迟了hBBCK脲变性时由去折叠态向中间体的转变过程。　　 氧化三甲胺作为渗透剂对hBBCK的酶活有抑制作用，脲的存在会加强这种抑制作用；氧化三甲胺能抑制hBBCK的热变性，1.0 M氧化三甲胺使hBBCK的Tm和去折叠自由能分别升高了4.5℃和0.9 kJmol-1；脲增强了hBBCK的热变性过程，而氧化三甲胺的存在减弱了这种作用。在pH 8.0和pH 4.0两种pH条件下，氧化三甲胺都能抑制脲引起的hBBCK的变性。　　 通过研究上述两种渗透剂对肌酸激酶的稳定性作用，有助于我们理解渗透剂稳定CK的机制，为寻找CK在生产应用中的稳定性保护剂提供参考。