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菊花为菊科的头状花序,是常用中草药,具有清热解毒,清肝明目,降血压之功效。菊花多糖是其主要生物活性成分之一,有增强免疫力,防衰老等多方面的药理作用。以黄山贡菊(C.Morifolium Rama Huang Shan.)为原料,主要研究了多糖含量测定方法的确立、多糖成分的提取工艺、分离纯化及其分子量。以葡萄糖为对照品,对测定菊花多糖含量的苯酚-硫酸法进行了改进。结果表明,5%苯酚和浓硫酸的体积比为1∶5,硫酸加入量与总体积比为5∶8,沸水浴恒温15min,冷却放置30min后在490nm处检测多糖含量,其显色稳定,重现性好,准确度较高,用此法测得多糖含量为9.46%。分别研究了浸提温度、醇沉终浓度、料液比和浸提时间等因素对多糖提取得率的影响。在此基础上进行正交实验,得到菊花粗多糖提取的最优工艺:提取温度95℃、提取时间3h、液固比25∶1醇沉终浓度80%,pH7.0和一次浸提,其得率为18.54%。微波助提可显著提高多糖提取效率,多糖得率较直接水提增加了13.3%。研究了Sevag法、三氯乙酸法、醇析+Sevag法对菊花多糖脱蛋白效果的影响。结果表明,Sevag法、三氯乙酸法、醇析+Sevag法的脱蛋白率分别为40%、66%、39%,多糖保留率分别为70%、54%和64%。Sevag法较适合于菊花多糖的脱蛋白。采用阴离子交换柱DEAE-52对菊花多糖进行初步分离,结果表明粗多糖存在两个组分,即CPS-Ⅰ、CPS-Ⅱ。采用Sephadex G-75对CPS-Ⅰ、CPS-Ⅱ进一步纯化,结果均得到单一、对称的洗脱曲线。紫外扫描结果表明多糖组分CPS-Ⅰ、CPS-Ⅱ在小于200nm处均有多糖吸收峰。采用HPLC法分析多糖组分的纯度和测定分子量,结果表明组分CPS-Ⅰ、CPS-Ⅱ的纯度均达到99%,分子量分别为13427、5268。