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蛋白激酶在植物生长、激素调节和生物与非生物逆境胁迫反应中起着重要的作用。实验室的前期研究中,我们已克隆到两个水稻抗病相关的MAPK蛋白激酶。为进一步研究抗病反应中的蛋白激酶,我们克隆鉴定了水稻中一个新的丝/苏氨酸蛋白激酶基因,OsBIWNK1。OsBIWNK1基因的cDNA全长2576bp,开放阅读框(ORF)2115bp,编码一个含704个氨基酸的蛋白,预期分子量79.8kD,等电点5.50。OsBIWNK1位于水稻7号染色体上,含有7外显子和6个内含子。OsBIWNK1蛋白N-端含有一个由11个丝/苏氨酸蛋白激酶亚结构域组成的蛋白激酶催化结构域,后面跟着一个大约60个氨基酸的PWNK模序。其中Ⅱ亚结构域中保守的赖氨酸(K)与拟南芥AtWNK1一样被天冬酰氨(N)所代替。OsBIWNK1蛋白氨基酸序列与拟南芥中的WNK(with no lysine(K)kinase)激酶组成员具有很高的相似性,因此,我们将该基因命名为OsBIWNK1(Oryza sativa L.BTH induced WNK1)。 为了解OsBIWNK1基因在抗病反应中的功能,我们将水稻OsBIWNK1基因的编码区插入到花椰菜花叶病毒CaMV-35S启动子下游,与载体系统CHF3构建水稻OsBIWNK1基因的植物转化双元表达载体。利用根癌农杆菌(Agrobactrium tumifaciens)介导的叶盘法转化烟草无毒苗,经卡那霉素(Kan~+)抗性筛选获得10株转OsBIWNK1基因T_o代烟草植株。通过提取转基因烟草基因组DNA,然后进行PCR检测,结果表明OsBIWNK1基因都整合到了烟草基因组中。同时我们也发现,转基因烟草植株的顶芽、腋芽、叶表现异常,开花期推迟。因此,我们认为OsBIWNK1蛋白还可能植物生长发育过程中起一定作用。